Pangalan ng kalakalan: Live plague vaccine (Vaccinum pestosum vivum)

internasyonal na pangalan: Bakuna para sa pag-iwas sa salot

Grupo ng pharmacological: bakuna sa MIBP

Pharmacological group para sa ATC: J07AK01. Bakuna sa salot - inactivated whole bacteria

Tambalan:

Ang live plague vaccine, lyophilisate para sa paghahanda ng suspensyon para sa iniksyon, cutaneous scarification application at inhalation, ay isang lyophilized live na kultura ng strain ng bakuna ng plague microbe Yersinia pestis EV line NIIEG, stabilizer: sucrose, gelatin, thiourea.

Paglalarawan:

Buhaghag na masa ng kulay-abo-puting kulay.

Pharmacodynamics:

Ang bakuna ay nagiging sanhi ng pag-unlad ng kaligtasan sa sakit na tumatagal ng hanggang isang taon.

Mga pahiwatig para sa paggamit:

Pag-iwas sa salot. Ang mga bata mula 2 taong gulang at matatanda na naninirahan sa mga lugar na enzootic para sa salot, pati na rin ang mga taong nagtatrabaho sa mga live na kultura ng ahente ng sanhi ng salot, ay napapailalim sa mga pagbabakuna.

Contraindications:

Talamak na nakakahawang at hindi nakakahawang sakit, malalang sakit sa talamak na yugto - ang mga pagbabakuna ay isinasagawa nang hindi mas maaga kaysa sa 1 buwan pagkatapos ng pagbawi (pagpapatawad).

Pangunahin at pangalawang immunodeficiencies. Kapag nagpapagamot ng mga steroid na gamot, antimetabolite, chemotherapy at radiotherapy, ang mga pagbabakuna ay isinasagawa nang hindi mas maaga kaysa sa 6 na buwan pagkatapos ng pagtatapos ng paggamot.

Mga sistematikong sakit nag-uugnay na tisyu.

Malignant neoplasms At malignant na sakit dugo.

Mga karaniwang paulit-ulit na sakit sa balat (na may pagbabakuna sa balat).

Mga malalang sakit sa paghinga (na may pagbabakuna sa paglanghap). Mga sakit na allergy (bronchial hika, anaphylactic shock, kasaysayan ng angioedema).

Panahon ng pagbubuntis at paggagatas.

regimen ng dosis:

Ang pagbabakuna ay isinasagawa nang isang beses sa pamamagitan ng subcutaneous, cutaneous, intradermal o inhalation na pamamaraan. Ang muling pagbabakuna ay isinasagawa sa pamamagitan ng pamamaraan ng balat pagkatapos ng isang taon, sa hindi kanais-nais na mga kondisyon ng epidemya - pagkatapos ng 6 na buwan.

Pagbabakuna sa pamamagitan ng cutaneous, subcutaneous at intradermal na pamamaraan.

Bago buksan, ang bawat ampoule ay siniyasat. Ang gamot ay hindi dapat gamitin kung ang integridad ng packaging ay nasira o may binago pisikal na katangian(mga dayuhang impurities, hindi matutunaw na mga natuklap), nag-expire, kung ang mga kondisyon ng imbakan ay nilabag.

Ang pagbubukas ng mga ampoules at ang pamamaraan para sa pangangasiwa ng gamot ay isinasagawa kapag mahigpit na pagsunod mga patakaran ng asepsis at antiseptics. Ang diluted na bakuna, na nakaimbak alinsunod sa mga patakaran ng asepsis, ay maaaring gamitin sa loob ng 2 oras Ang paglipat ng isang bukas na ampoule mula sa isang silid patungo sa isa pa ay hindi pinapayagan. Ang hindi nagamit na bakuna ay sinisira sa pamamagitan ng pagpapakulo sa loob ng 30 minuto.

Kaagad bago ang pagbabakuna, ang bakuna ay diluted na may 1.8 ml ng 0.9% sodium chloride solution para sa iniksyon. Ang gamot ay dapat na ganap na matunaw sa loob ng 3 minuto. Ang mga ampoules ng bakuna ay inalog. Ang natunaw na bakuna ay isang homogenous na suspensyon na wala mga banyagang dumi at mga cereal. Ang resultang suspensyon ay kinuha mula sa ampoule gamit ang isang sterile syringe at inilipat sa isang sterile vial na naglalaman ng 0.9% sodium chloride injection solution sa dami na naaayon sa ipinahiwatig sa label ng kahon para sa naaangkop na ruta ng pangangasiwa. Sa kasong ito, ang dami ng 0.9% na solusyon ng sodium chloride na ginamit upang ihanda ang paunang pagbabanto ay isinasaalang-alang.

Depende sa edad ng mga nabakunahan at ang paraan ng pangangasiwa, ang mga sumusunod na dosis ng bakuna ay ginagamit.

MGA DOSES PARA SA PAGBAKUNA

Edad magpabakuna atin	Dosis ng bakuna (bilang ng mga nabubuhay na microbial cell) para sa administrasyon ni...
	intradermal	subcutaneous	sa balat	paglanghap nom
14-60 taon - 1)	1 dosis-300 milyon buhay na mikrobyo mga cell (f.m.c.) sa.1 ml	1 dosis-300 milyon f.m.k. sa.5 ml	1 dosis - 3 bilyong zh.m.k. V 0.15 ml (3 patak)	1 dosis - bilyong zh.m.k. sa.15 ml
Higit sa 60 taon	1/3 dosis - 100 milyon zh.m.k. V 0.1 ml	Hindi sila nagbabakuna	1 dosis - 3 bilyong zh.m.k. V 0.15 ml (3 patak)	Hindi sila nagbabakuna
10-13 taon	1/2 dosis - 150 milyon zh.m.k. sa,1 ml	Hindi sila nagbabakuna	1 dosis - 3 bilyong zh.m.k. V 0.15 ml (3 patak)	Hindi sila nagbabakuna
7-9 taon	1/3 dosis - milyon f.m.k. sa 0.1 ml	Hindi sila nagbabakuna	2/3 dosis - 2 bilyong zh.m.k. V 0.1 ml (2 patak)	Hindi sila nagbabakuna
2-6 na taon	1/3 dosis - milyon f.m.k. sa 0.1 ml	Hindi sila nagbabakuna	1/3 dosis - 1 bilyong zh.m.k. V 0.05 ml (1 drop)	Hindi sila nagbabakuna
Tandaan - 1) - ang mga babaeng nagpapasuso ay nabakunahan lamang sa ilalim ng balat

Pamamaraan ng balat.

Ang pagbabakuna ay isinasagawa sa panlabas na ibabaw gitnang ikatlong bahagi ng balikat tulad ng sumusunod: na may isang may sapat na gulang na bulutong bulutong, bahagyang simutin (hanggang sa pamumula) ang ibabaw na layer ng epidermis sa 3 bahagi ng balat na paunang ginagamot sa 70 degrees. ethyl alcohol. Ang distansya sa pagitan ng mga seksyon ay mula 3 hanggang 4 cm, ang lugar ng seksyon ay mula 1 hanggang 1.5 cm2. Kapag binabakunahan ang mga bata, ang epidermis ay nasimot sa 1 o 2 bahagi ng balat.

Ang 1 patak ng bakuna ay inilalapat sa bawat lugar ng balat na may scarified na may isang pipette, pagkatapos nito, gamit ang isang indibidwal na panulat ng pagbabakuna ng bulutong, 4 na pahalang at 4 na patayong linear incision na 1 cm ang haba ay inilapat sa bawat patak ng bakuna isang panulat sa pagbabakuna ng bulutong, maingat na kuskusin ang mga patak ng bakuna sa balat na may scarified sa loob ng ilang segundo at bigyan ng tuyo sa loob ng 5 minuto. Ang mga hiwa ay dapat gawin mababaw upang hindi sila dumugo (ang dugo ay maaari lamang lumitaw sa anyo ng maliliit na patak ng hamog). Ang isang hiwalay na disposable smallpox vaccination pen ay ginagamit para sa bawat taong nabakunahan. Ipinagbabawal na gumamit ng mga karayom, scalpel, atbp. sa halip na mga panulat.

Pamamaraan sa ilalim ng balat.

Mahigpit na ipinagbabawal na gumamit ng bakunang diluted para sa paggamit ng balat! Ang balat sa lugar ng iniksyon ay paunang ginagamot sa 70 degrees. ethyl alcohol. Ang bakuna ay ibinibigay gamit ang isang hiringgilya sa ibaba ng anggulo ng scapula o gamit ang isang walang karayom ​​na injector na BI-ZM na may anti-infective protector na PPI-2 sa itaas na ikatlong bahagi ng balikat sa likod ng deltoid na kalamnan.

Pamamaraan ng intradermal.

Ang bilang ng mga dosis at dami ng solvent para sa mga kabataan mula 14 taong gulang at matatanda hanggang 60 taong gulang ay ipinahiwatig sa label ng kahon. Para sa pagbabakuna ng mga batang may edad na 10-13 taon, ang dami ng solvent sa panahon ng pangalawang pagbabanto ay nadoble; Ang bakuna ay ibinibigay sa mga matatanda at bata sa dami ng 0.1 ml intradermally sa lugar ng panlabas na ibabaw ng kaliwang balikat pagkatapos gamutin ang balat sa 70 degrees. ethyl alcohol gamit ang walang karayom ​​na injector na BI-ZM na may anti-infective protector na PPI-2 o isang 1 ml syringe na may manipis na karayom ​​na may maikling bevel.

Pagbabakuna sa pamamagitan ng paraan ng paglanghap.

Ang pagbabakuna ay isinasagawa sa mga espesyal na permanenteng o pansamantalang lugar na may dami na 50 hanggang 150 m3, taas na 2.5 hanggang 4.5 m (ang ratio ng haba at lapad ay hindi hihigit sa 2:1). Ang mga silid na ito ay dapat na iangkop para sa mabilis na bentilasyon, at ang mga nakatigil na inhalation room ay dapat na nilagyan ng exhaust ventilation.

Ang bakuna ay diluted na may 2 ml ng isang sterile 10% lactose solution. Ang ampoule ay inalog hanggang sa makuha ang isang homogenous na suspensyon. Kung ang mga dayuhang dumi o hindi pantay na pagsususpinde ay nakita, ang paggamit ng gamot ay ipinagbabawal. Ang resultang suspensyon ay inilipat sa isang sterile na bote na may kinakailangang dami ng 10% lactose solution para sa karagdagang pagbabanto (ayon sa mga tagubilin sa kahon). Sa kasong ito, ang dami ng 10% lactose solution na ginamit upang ihanda ang paunang pagbabanto ay isinasaalang-alang. Ang temperatura ng 10% lactose solution ay dapat na tumutugma sa temperatura kung saan ang tuyo na paghahanda ay nakaimbak bago ang pagbabanto.

Ang nagresultang microbial suspension sa isang halaga na tinutukoy ng dami ng silid (0.1 ml bawat 1 m3 ng silid) ay ibinuhos sa spray tank. Ang pag-spray ay isinasagawa gamit ang isang pneumatic ejection type sprayer. Ang sprayer ay naka-install patayo, na may nozzle sa itaas, sa gitna ng silid sa taas na 80-120 cm mula sa sahig. Ang pag-spray ay isinasagawa gamit ang naka-compress na hangin sa ilalim ng presyon ng 1.2 atm hanggang ang suspensyon na ibinuhos sa tangke ay ganap na natupok. Ang naka-compress na hangin ay ibinibigay sa nebulizer hanggang sa katapusan ng sesyon ng pagbabakuna. Ang tagal ng sesyon ng pagbabakuna ay 5 minuto. Ang isang dosis ng tao para sa paglanghap ay (5+/-3) x 106 na buhay na microbial cell.

Ang bilang ng mga taong nabakunahan sa isang sesyon ay tinutukoy batay sa 1.4 hanggang 2 m3 ng espasyo bawat tao.

Pagkatapos ng bawat sesyon ng pagbabakuna, ang inhalation room ay maaliwalas ng hindi bababa sa 5 minuto. Kapag nagsasagawa ng pagbabakuna sa isang tolda, pagkatapos ng bawat sesyon, ang mga kurtina ay nakatiklop nang hindi bababa sa 5 minuto. Ang mga tauhan na nagsasagawa ng pagbabakuna, kung kinakailangan na pumasok sa silid ng paglanghap sa panahon ng sesyon at ang unang 5 minuto pagkatapos nito makumpleto, ay dapat na nakasuot ng espesyal na damit (kasuotang panloob, medyas, cotton overalls, gas mask, tsinelas).

Isinagawa sa iba't ibang paraan ang mga pagbabakuna ay nakarehistro sa itinatag na mga form ng pagpaparehistro na nagpapahiwatig ng pangalan ng gamot, tagagawa, petsa ng pagbabakuna, dosis, paraan ng pangangasiwa, numero ng batch, petsa ng pag-expire, reaksyon sa pagbabakuna.

Reaksyon sa pagpapakilala. Pagkatapos ng pagbabakuna sa balat, pagkalipas ng 24-48 oras, maaaring mangyari ang hyperemia at infiltration sa lugar ng pangangasiwa ng bakuna, na sinusundan ng pagbuo ng mga madilaw na crust sa kahabaan ng mga incisions.

Mga side effect:

Ang mga pagbabakuna na may live na bakuna sa salot ay maaaring samahan ng parehong pangkalahatan at lokal na mga reaksyon, ang intensity nito ay depende sa paraan ng pagbabakuna.

Ang cutaneous grafting ay maaaring sinamahan ng isang maliit na vesicular rash sa kahabaan ng mga hiwa; Ang rehiyonal na lymphadenitis ay hindi gaanong karaniwan. Ang mga sintomas na ito ay nagsisimulang lumitaw 8-10 oras pagkatapos ng pagbabakuna at umabot sa buong pag-unlad pagkatapos ng 23-30 na oras Ang pangkalahatang reaksyon ay nangyayari sa unang araw at ipinahayag ng pagtaas ng temperatura sa 37.5 degrees. SA.

Pagkatapos ng pagbabakuna sa subcutaneous at intradermal, ang mga lokal na reaksyon ay maaaring maobserbahan sa anyo ng hyperemia, pananakit, paglusot na may diameter na hanggang 50 mm, at mas madalas, pagpapalaki ng mga rehiyonal na lymph node. Mga lokal na reaksyon lumitaw pagkatapos ng 6-10 na oras, maabot ang buong pag-unlad pagkatapos ng 24-48 na oras at mawala pagkatapos ng 4-5 araw. Ang pangkalahatang reaksyon ay ipinahayag sa karamdaman, sakit ng ulo, at lagnat hanggang 37.5 degrees. C, sa isang porsyento ng mga nabakunahang tao hanggang sa (38.0-39.0) degrees. Sa tagal ng hanggang 3 araw. Ang pagduduwal at pagsusuka ay minsan ay sinusunod.

Pagkatapos ng pagbabakuna sa paglanghap, ang isang maliit na bilang ng mga nabakunahan ay maaaring makaranas ng karamdaman, pananakit ng ulo, pananakit ng kalamnan, at lagnat hanggang 38.5 degrees. C at napakabihirang hanggang 40 degrees. C. Ang tagal ng reaksyon ay 1-3 araw. Batay sa oras ng paglitaw, dalawang uri ng mga reaksyon ang sinusunod: maaga, umuunlad sa unang dalawang araw at katangian ng mga paulit-ulit na nabakunahan; huli, lumilitaw sa mga araw 5-7, at mas karaniwan sa mga pangunahing nabakunahan.

Bago gamitin sa masa, ang bawat serye ng bakuna ay dapat masuri sa isang grupo ng mga tao na may 50-100 katao, katumbas ng edad at kalusugan ng pangunahing contingent ng mga nabakunahan. Ang bakuna ay maaaring gamitin para sa mass vaccination kung ang bilang ng katamtaman (pagtaas ng temperatura ng katawan sa 37.6-38.5 degrees C) at malakas (pagtaas ng temperatura ng katawan sa itaas 38.5 degrees C) na mga reaksyon sa pangangasiwa nito ay hindi lalampas sa 29%, ayon sa pagkakabanggit 5% para sa subcutaneous administration, 1% ng katamtamang reaksyon para sa cutaneous administration at 6% ng katamtaman o 4% ng malubhang reaksyon para sa paraan ng paglanghap pagpapakilala.

Pakikipag-ugnayan:

Ang pangangasiwa ng live na bakuna sa salot kasama ang paggamit ng streptomycin, tetracycline at sulfonamides antibiotics sa therapeutic doses nang sabay-sabay at mas maaga sa 14 na araw pagkatapos ng pagbabakuna ay hindi pinapayagan.

Ang sabay-sabay na pagbabakuna sa balat ng mga matatanda laban sa salot, brucellosis at tularemia ay pinapayagan sa iba't ibang lugar panlabas na ibabaw ng itaas na ikatlong bahagi ng balikat.

Pinakamahusay bago ang petsa:

Buhay ng istante - 3 taon. Ang isang gamot na nag-expire na ay hindi maaaring gamitin.

Mga kondisyon ng imbakan:

Mag-imbak alinsunod sa SP 3.3.2.1248-03 sa temperatura mula 0 hanggang 8 degrees. Hindi maabot ng mga bata.

Dinala alinsunod sa SP 3.3.2.1248-03 sa temperatura mula 0 hanggang 8 degrees. SA.

Petsa ng pag-update ng tagubilin 20.01.2014

Tagagawa: , Russia

Form ng paglabas: lyophilisate para sa paghahanda ng isang concentrate para sa paghahanda ng isang solusyon para sa pagbubuhos, bote

Mga kondisyon ng bakasyon:

Data ng estado pagpaparehistro: LP-000535 na may petsang 05/12/2011

Petsa ng muling pagpaparehistro ng RU: 05.11.2014

petsa ng pag-expire 05/12/2016

Numero ng artikulo ng parmasyutiko: LP 000535-120511

Tagagawa: , Russia

May hawak ng Sertipiko sa Pagpaparehistro: 48 Central Research Institute ng Ministry of Defense Russian Federation(Central Research Institute ng Russian Ministry of Defense) Federal State Budgetary Institution, Russia

Release form: lyophilisate para sa paghahanda ng isang suspensyon para sa iniksyon, cutaneous scarification at inhalation 1 bote ay naglalaman ng mula 80 hanggang 430 subcutaneous doses para sa, Penicillin glass bottles, sarado na may stoppers

Mga kondisyon ng bakasyon: para sa mga institusyong medikal

Data ng estado pagpaparehistro: LP-000535 na may petsang 05/12/2011

Petsa ng muling pagpaparehistro ng RU: 05.11.2014

Katayuan ng sertipiko ng pagpaparehistro: kasalukuyang

Numero ng artikulo ng parmasyutiko: LP 000535-120511

Tagagawa: , Russia

May hawak ng Sertipiko sa Pagpaparehistro: Stavropol Research Anti-Plague Institute Federal State Budgetary Institution, Russia

Form ng paglabas: lyophilisate para sa paghahanda ng suspensyon para sa iniksyon, aplikasyon ng scarification sa balat at paglanghap, ampoules

Mga kondisyon ng bakasyon: para sa mga institusyong medikal

Data ng estado pagpaparehistro: LSR-005759/08 na may petsang 07/22/2008

Petsa ng muling pagpaparehistro ng RU: 19.08.2013

Katayuan ng sertipiko ng pagpaparehistro: kasalukuyang

Numero ng artikulo ng parmasyutiko: FSP 42-8654-07

Tagagawa: , Russia

May hawak ng Sertipiko sa Pagpaparehistro: 48 Central Research Institute ng Ministry of Defense ng Russian Federation (TsNII ng Ministry of Defense ng Russia) Federal State Budgetary Institution, Russia

Mga form ng paglabas: lozenges, garapon

Mga kondisyon ng bakasyon: para sa mga institusyong medikal

Data ng estado pagpaparehistro: LSR-008997/09 na may petsang 09.11.2009

Petsa ng muling pagpaparehistro ng RU: 05.11.2014

Katayuan ng sertipiko ng pagpaparehistro: kasalukuyang

Numero ng artikulo ng parmasyutiko: LSR-008997/09-091109

Tagagawa: Research Center (military unit 23527, naka-istasyon sa Kirov), Russia

May hawak ng Sertipiko sa Pagpaparehistro: 33 Central Research Testing Institute ng Ministry of Defense ng Russian Federation FBU, Russia

Buksan ang dokumentong ito ngayon o hilingin ito sa pamamagitan ng Hotline sa system.

Passive immunization. Hindi tulad ng mga bakuna, ang aktibidad ng proteksiyon na kung saan ay nagpapakita ng sarili nang hindi mas maaga kaysa sa 5-7 araw pagkatapos ng pangangasiwa at nakasalalay sa kakayahan ng macroorganism na magkaroon ng sapat na immune response, ang pangangasiwa ng mga handa na tiyak na antibodies ay isang paraan ng agarang proteksyon laban sa impeksyon. , anuman ang indibidwal katayuan ng immune. Ang mga antibodies ay bahagyang nakakalason at lubos na pumipili. Ang tagal ng matinding kaligtasan sa sakit ay maaaring umabot ng ilang linggo dahil sa katotohanan na ang ilang mga isotype ng IgG ng tao ay may kalahating buhay na higit sa 30 araw. Ang mga proteksiyon na katangian ng monoclonal antibodies sa F1 at V antigen ng Y. pestis ay ipinakita sa pagmomodelo ng parehong bubonic at pneumonic na salot.

Sa mga nagdaang taon, sa pagdating ng mga bagong teknolohiya: hybridomas, bacterial, vector at phage system, nagkaroon ng pambihirang tagumpay sa teknolohiya ng produksyon ng preventive at therapeutic immunoglobulins.

Walong monoclonal antibodies ang binigyan ng lisensya sa loob ng mahigit 20 taon upang klinikal na aplikasyon, at tatlo sa kanila ay heterohybridoma (mouse-human), lima ay "humanized" na monoclonal antibodies ng mouse. Gayunpaman, kasama ng mga ito ay walang prophylactic o therapeutic na lisensyadong anti-plague monoclonal antibodies, na maaaring ipaliwanag mataas na antas aggressiveness ng plague pathogen, transience proseso ng pathological at ang pagiging kumplikado ng hindi kumpleto na pinag-aralan na patho- at immunogenesis ng salot na may nangingibabaw na cellular defense system ng katawan.

Aktibong pagbabakuna. PINATAY ANG BUONG CELL VCCINES. Ang pagbabakuna sa pag-iwas sa salot ay nagsimula nang higit sa 100 taon. Ang mga unang bakuna ay inihanda mula sa mga bakterya ng salot na pinatay sa iba't ibang paraan sa pagtatapos ng ika-19 at simula ng ika-20 siglo. Ang pinakakaraniwang ginagamit na bakuna, lalo na sa India, ay ang heat-inactivated at phenol-preserved na bakunang Haffkine. Nag-ambag ito sa pagbawas sa morbidity at mortality mula sa salot sa panahon ng mga pagsubok sa mga lugar ng epidemya. Batay sa maraming taon ng karanasan sa malawakang pagbabakuna na may pinatay na mga bakunang corpuscular sa Manchuria, Java at Madagascar, napagpasyahan ng mga mananaliksik na ang mga tao ay nakakakuha ng kamag-anak na kaligtasan sa sakit, bilang ebidensya ng mga kaso ng sakit sa mga nabakunahan, bagaman mas madalas kaysa sa mga hindi nabakunahan na mga pasyente.

Sa takot na mabaligtad ang virulence ng live na anti-plague vaccine na EV, na mas mataas sa epidemiological na bisa ng mga pumatay na bakuna, at binanggit ang mataas na reactogenicity nito, binuo ng mga espesyalista sa United States ang anti-plague vaccine na USP, na binubuo ng mga microbes ng virulent. strain Y. pestis 195P pinatay ng formaldehyde. Ang bakunang ito ay lisensyado at ginawa mula 1946 hanggang 1998. Ang isang katulad na bakunang salot ng USP mula sa strain sa itaas ay ginawa sa Australia; ito ay lisensyado para sa klinikal na paggamit sa loob lamang ng bansa. Ang bakuna ay ibinibigay ng dalawang beses na may pagitan ng 1-4 na linggo at pagkatapos ay isang booster vaccination ang isasagawa pagkatapos ng 6 na buwan. Liquid na anti-salot inactivated na bakuna Ang I.P., na isang pinahusay na bakunang Haffkine, ay ginawa sa India.

LIVE ATTENUATED VACCINES. Napakalaking paggamit ng mga live na bakuna noong 1920s at 30s. sa mga lugar na endemic ng salot ay nagbigay ng nakakumbinsi na katibayan ng kanilang kaligtasan at pagiging epektibo kumpara sa mga napatay na bakuna laban sa salot. Kasabay nito, ang live na anti-plague na bakuna, depende sa mga kondisyon ng paggamit at ang nakakahawang dosis, ay protektado sa isang tiyak na lawak laban sa pneumonic na anyo ng salot. Sa nakalipas na mga dekada, milyon-milyong tao ang nabakunahan ng live na bakuna sa salot nang walang anumang malubhang komplikasyon. Sa maraming mga attenuated na strain ng bakuna sa salot na iminungkahi para gamitin pinakamalaking kalamangan nagtataglay ng Y. pestis EV strain, na nakuha ng mga Pranses na siyentipiko na sina Girard at Robic bilang resulta ng buwanang subculture sa nutrient agar sa temperatura na 18-20 ° C sa loob ng 5 taon. Noong 1936, ang EV vaccine strain ay inilipat ni Girard mula sa Pasteur Institute sa Tananarive (Madagascar) sa mga siyentipikong Sobyet.

Mula noong 1942, ang mga malawakang pagbabakuna gamit ang live plague vaccine EV ay inayos sa USSR. Sa kasalukuyan, ang isang komersyal (lisensyado) na live dry vaccine laban sa salot mula sa Y. pestis EV strain ng linya ng NIIEG para sa paggamit ng percutaneous at aerosol ay ginawa sa Russian Federation sa Stavropol Anti-Plague Institute, at sa 48th Central Research Institute ng Ministry of Defense ng Russian Federation (Kirov) ang isang gamot ay ginawa din para sa mga pagbabago sa loob. Ang isang katulad na bakuna (maliban sa mga tablet) ay ginawa sa dating Alma-Ata Anti-Plague Institute. Dapat pansinin na ang komersyal na antiplague live na bakuna ginawa rin sa Indonesia mula sa isa pang attenuated strain ng Y. pestis - Harbin. Ayon sa modernong mga tagumpay biotechnology, microbiology, biochemistry sa Russian Federation paggawa ng anti-plague live dry vaccine sa lahat ng yugto teknolohikal na proseso, simula sa paghahanda ng materyal na binhi at nagtatapos sa freeze-drying ng gamot at packaging ng tapos na produkto, ay patuloy na pinagbubuti.

Ang gamot ay isang lyophilized na live na kultura ng strain ng bakuna ng plague microbe EV mula sa linya ng NIIEG na may stabilizer. Ang pagbabakuna ay isinasagawa nang isang beses sa pamamagitan ng subcutaneous, cutaneous, intradermal o inhalation na pamamaraan. Upang bumuo ng kaligtasan sa sakit laban sa pneumonic plague, ang paraan ng paglanghap ng pagbibigay ng bakuna ay mas kanais-nais. Sa panahon ng percutaneous immunization ng mga hayop na sensitibo sa salot na may strain ng EV vaccine, ang mga alveolar macrophage, hindi tulad ng mga peritoneal macrophage, ay sumasailalim sa mga pagbabago na hindi nakakaapekto sa kanilang aktibidad na bactericidal at hindi sinasamahan ng muling pamamahagi ng kanilang mga subpopulasyon. Kasabay nito, ang aerogenic immunization ay nagdudulot ng mas matinding pag-activate ng alveolar macrophage kumpara sa peritoneal cells, na nagreresulta sa muling pamamahagi ng mga subpopulasyon at muling pagsasaayos ng likas na katangian ng phagocytosis - mula sa hindi kumpleto hanggang sa nakumpleto. 

SUBUNIT (KEMIKAL) NA BAKUNA. Ang unang henerasyon ng mga bakunang salot ay kinabibilangan ng mga pinatay na corpuscular at live attenuated na mga bakuna; Ang ikalawang henerasyon ay kinakatawan ng mga bakunang kemikal (subunit) batay sa mga proteksiyong antigen.

Sa kasalukuyan, dahil sa pagtigil ng produksyon ng USP anti-plague vaccine sa United States noong 1998, masinsinang isinasagawa ang pananaliksik upang lumikha ng kemikal na bakuna na kinabibilangan ng mga proteksiyong antigen ng Y. pestis. Ang pinaka-epektibo ay itinuturing na isang kemikal na bakuna laban sa salot na naglalaman ng capsular FI- at V-antigen, na sa mga eksperimento sa mga hayop sa laboratoryo, kabilang ang mga primata, ay nagpoprotekta sa kanila mula sa bubonic at pneumonic na salot na dulot ng parehong F at F strain ng Y. pestis ( kabaligtaran sa bakuna sa USP, na may proteksiyon na epekto, pangunahin laban sa percutaneous infection), at kapwa ang capsular FI antigen at (sa mas malaking lawak) ang V antigen, kabilang ang V antigen ng Y. pseudotuberculosis, ay may hiwalay na aktibidad ng proteksyon. . Ang mga kamakailang klinikal na pagsubok ng subunit plague vaccine (rFI+rV) sa 145 na boluntaryo ay nagpakita ng kaligtasan at immunogenicity nito. Sa Russian Federation, isang chemical plague vaccine ang ginagawa, na binubuo ng capsular antigen FI ng Y. pestis at ang pangunahing somatic antigen ng Y. pseudotuberculosis. Ang layunin nito ay muling pagbabakuna ng mga taong unang nabakunahan ng isang live na anti-plague na bakuna, na lumilikha ng ganap na genetic immunity. sa isang halo na may kabuuang DNA ng Y. pestis, na may binibigkas na kakayahan na i-activate ang parehong nonspecific at tiyak na paglaban ng katawan sa mga tao at hayop.

Mula noong panahon ng mga unang epidemya ng salot, ang mga medikal na practitioner ay nagtalo tungkol sa kung posible bang mahawaan ng salot mula sa isang pasyente o hindi, at kung gayon, sa anong paraan. Nagkaroon ng magkasalungat na opinyon. Sa isang banda, pinagtatalunan na delikado ang paghawak sa mga maysakit at ang kanilang mga gamit. Sa kabilang banda, ang pagiging malapit sa mga pasyente at ang pagiging nasa isang nahawaang lugar ay itinuturing na ligtas. Walang malinaw na sagot, dahil hindi palaging humahantong sa impeksyon ang paghuhugas ng nana ng pasyente sa balat o pagsusuot ng kanyang damit.

Maraming doktor ang nakakita ng koneksyon sa pagitan ng salot at malaria. Ang unang eksperimento sa self-infection na may salot ay isinagawa sa lungsod ng Alexandria noong 1802 ng Ingles na doktor na si A. White. Nais niyang patunayan na ang salot ay maaaring magdulot ng pag-atake ng malaria. Inilabas ni White ang purulent na laman ng bubo ng pasyente ng salot at ipinahid ito sa kanyang kaliwang hita. Kahit na may lumitaw na carbuncle sa sarili niyang hita at mga lymph node nagsimulang dumami, patuloy na sinasabi ng doktor na siya ay may sakit na malaria. Sa ikawalong araw lamang, nang maging malinaw ang mga sintomas, na-diagnose niya ang kanyang sarili na may salot at dinala sa ospital, kung saan siya namatay.

Malinaw na ngayon na ang salot ay pangunahing naipapasa mula sa tao patungo sa tao sa pamamagitan ng airborne droplets, samakatuwid, ang mga pasyente, lalo na ang may pneumonic plague, ay nagdudulot ng malaking panganib sa iba. Gayundin, ang pathogen ng salot ay maaaring makapasok sa katawan ng tao sa pamamagitan ng dugo, balat at mga mucous membrane. Bagaman ang sanhi ng sakit sa mahabang panahon nanatiling hindi malinaw, ang mga doktor ay matagal nang naghahanap ng mga paraan upang maprotektahan kakila-kilabot na sakit. Matagal bago ang panahon ng mga antibiotics, sa tulong ng kung saan ang salot ay lubos na matagumpay na gumaling ngayon, nag-alok sila ng bakuna prophylaxis iba't ibang paraan pagtaas ng resistensya ng katawan sa salot.

Ang isang eksperimento na isinagawa noong 1817 ng Austrian na doktor na si A. Rosenfeld ay natapos nang malungkot. Tiniyak niya na ang gamot, na inihanda mula sa bone powder at pinatuyong lymph glands na kinuha mula sa mga labi ng mga namatay mula sa salot, kapag ininom nang pasalita, ay ganap na nagpoprotekta laban sa sakit. Sa isa sa mga ospital sa Constantinople, ikinulong ni Rosenfeld ang kanyang sarili sa isang ward na may dalawampung pasyente ng salot, na dati nang uminom ng gamot na kanyang inanunsyo. Sa una naging maayos ang lahat. Ang anim na linggong inilaan para sa eksperimento ay nagtatapos, at ang mananaliksik ay aalis na sana sa ospital nang bigla siyang nagkasakit ng bubonic plague, kung saan siya namatay.

Ang eksperimento ng doktor ng Russia na si Danila Samoilovich ay natapos nang mas matagumpay. Pinausok ng kanyang kasamahan gamit ang mga makamandag na pulbos ang damit na panloob ng isang lalaking namatay sa salot. Pagkatapos ng pamamaraang ito, inilagay ni Samoilovich ang damit na panloob sa kanyang hubad na katawan at isinuot ito sa loob ng isang araw. Tamang naniniwala si Samoilovich na ang "buhay na simula ng ulcerative" (iyon ay, pagsasalita modernong wika, ang causative agent ng salot) ay dapat mamatay mula sa pagpapausok. Ang eksperimento ay matagumpay, si Samoilovich ay hindi nagkasakit. Kaya, ang agham, isang daang taon bago ang pagtuklas ni Yersin, ay nakatanggap ng hindi direktang kumpirmasyon na ang sanhi ng salot ay isang buhay na mikroorganismo.

Nagpatuloy ang paghahanap ng paraan para maiwasan at magamot ang salot. Ang unang therapeutic anti-plague serum ay inihanda ni Yersen. Matapos iturok ang serum sa mga pasyente, ang salot ay umusad sa mas banayad na anyo, at bumaba ang bilang ng mga namamatay. Bago buksan mga gamot na antibacterial ang bakunang ito ay ang pangunahing panterapeutika na ahente sa paggamot ng salot, ngunit hindi ito nakatulong sa pinakamalubhang, baga, na anyo ng sakit.

Noong 1893-1915, si Vladimir Khavkin, isang nagtapos sa Novorossiysk University, ay nagtrabaho sa India. Noong 1896, sa Bombay, nag-organisa siya ng isang laboratoryo kung saan nilikha niya ang unang napatay na bakuna laban sa salot sa mundo at sinubukan ito sa kanyang sarili. Ang bagong bakuna ay may parehong panterapeutika at aksyong pang-iwas. Pagkatapos ng pagbabakuna, ang morbidity ay bumaba ng kalahati, at ang namamatay ng apat. Ang mga pagbabakuna gamit ang bakunang Haffkine ay naging laganap sa India. Hanggang sa 40s ng ika-20 siglo, ang bakunang Haffkine ay nanatiling mahalagang tanging lunas para sa salot. Noong 1956, ito ay 60 taon mula noong nilikha ang anti-plague laboratoryo (mula noong 1925 - ang Khavkin Bacteriological Institute). Kaugnay nito, sinabi ng Pangulo ng India na si Prasad: “Kami sa India ay lubos na nagpapasalamat kay Dr. Vladimir Khavkin. Tinulungan niya ang India na maalis ang mga epidemya ng salot at kolera.”

Sa ating bansa, ang pagbuo ng mga live na bakuna laban sa salot ay nagsimula noong 1934 na may resibo sa Stavropol Anti-Plague Research Institute ng M.P. Pokrovskaya bagong strain ng bakuna sa pamamagitan ng paggamot sa kultura ng pathogen ng salot na may mga bacteriophage. Matapos subukan ang bakuna sa mga hayop, si Pokrovskaya at ang kanyang katuwang ay nag-inject ng kanilang sarili sa ilalim ng balat ng 500 milyong mikrobyo ng humihinang kulturang ito ng salot na bacillus. Ang katawan ng mga eksperimento ay tumugon nang husto sa pagpapakilala ng mga "banyagang" microorganism na may pagtaas ng temperatura, pagkasira pangkalahatang kondisyon, pagpapakita ng isang reaksyon sa lugar ng iniksyon. Gayunpaman, pagkatapos ng tatlong araw, lahat ng sintomas ng sakit ay nawala. Dahil sa gayon ay nakatanggap ng "pagsisimula sa buhay," ang bakuna ay nagsimulang matagumpay na magamit sa pag-aalis ng pagsiklab ng salot sa Mongolia.

Kasabay nito, sa mga isla ng Java at Madagascar, ang mga siyentipikong Pranses na sina L. Otten at G. Girard ay nagtrabaho din sa paglikha ng isang live na bakuna. Nagawa ni Girard na ihiwalay ang isang strain ng microbe ng salot, na kusang nawala ang virulence, iyon ay, hindi na ito mapanganib sa mga tao. Pinangalanan ng siyentipiko ang bakuna batay sa strain na ito pagkatapos ng mga inisyal ng batang babae na namatay sa Madagascar kung saan ito nahiwalay - EV. Ang bakuna ay lumabas na hindi nakakapinsala at lubos na immunogenic, kaya ang EV strain ay ginagamit pa rin hanggang ngayon upang maghanda ng isang live na anti-plague na bakuna.

Ang isang bagong bakuna laban sa salot ay nilikha ng isang mananaliksik sa Irkutsk Anti-Plague Research Institute of Siberia and the Far East V.P. Smirnov, na lumahok sa pag-aalis ng 24 na lokal na paglaganap ng salot sa labas ng ating bansa. Batay sa maraming mga eksperimento sa mga hayop sa laboratoryo, kinumpirma niya ang kakayahan ng microbe ng salot na maging sanhi ng pulmonary form ng sakit kapag nahawahan sa pamamagitan ng conjunctiva ng mata. Ang mga eksperimentong ito ay naging batayan para sa pagbuo ng conjunctival at pinagsamang (subcutaneous-conjunctival) na mga paraan ng pagbabakuna laban sa salot. Upang mapatunayan ang pagiging epektibo ng kanyang iminungkahing pamamaraan, iniksyon ni Smirnov ang kanyang sarili ng isang bagong bakuna at sa parehong oras ay nahawahan ang kanyang sarili ng isang mabangis na strain ng pinaka-mapanganib, pneumonic, na anyo ng salot. Para sa kadalisayan ng eksperimento, ang siyentipiko ay tiyak na tumanggi sa paggamot. Sa ika-16 na araw pagkatapos ng impeksyon sa sarili, umalis siya sa isolation ward. Ayon sa pagtatapos ng medikal na komisyon, si Smirnov ay nagdusa mula sa cutaneous bubonic form ng salot. Sinabi ng mga eksperto na ang iminungkahing V.P. Ang mga paraan ng pagbabakuna ni Smirnov ay naging epektibo. Kasunod nito, sa Mongolian People's Republic, sa panahon ng pag-aalis ng pagsiklab ng salot, 115,333 katao ang nabakunahan gamit ang mga pamamaraang ito, kung saan dalawa lamang ang nagkasakit.

Mga may-ari ng patent RU 2510825:

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology at may kinalaman sa isang paraan para sa paggawa ng isang gamot batay sa isang strain ng bakuna ng microbe ng salot. Ang ipinakita na imbensyon ay nagsasangkot ng paggawa ng isang binhi na katutubong kultura ng isang mikrobyo ng salot, ang konsentrasyon ng isang microbial suspension, ang paghahanda ng isang suspensyon ng bakuna at ang paggawa ng isang tuyo na anyo ng gamot, habang ang paghahanda ng kultura ng binhi ay kinabibilangan ng paglilinang. ng mga mikrobyo sa isang likidong nutrient medium sa mga bote sa loob ng 48 oras sa temperatura na 26...28˚C at tuluy-tuloy na pag-aeration ng hindi bababa sa 10 l min -1 na may nakapasa na stabilized na starter culture na nakuha bilang resulta ng tatlong sunud-sunod na pagpasa sa pamamagitan ng katawan ng mga guinea pig at halo-halong sa isang 2:1 ratio na may isang stabilizing glycerol-lactose-polyglucin likido kapag naghahanda ng suspensyon ng bakuna, isang proteksiyon komposisyon na-optimize para sa pagpapatayo ng kapaligiran, at lyophilization ay isinasagawa kasunod ng isang tiyak na rehimen; Ginagawang posible ng ipinakita na solusyon na makakuha ng isang produkto na may mas mataas na aktibidad habang binabawasan ang tagal ng proseso ng pagmamanupaktura. 3 may sakit, 6 na mesa.

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology, lalo na sa mga pamamaraan para sa paggawa ng mga paghahanda ng bacterial batay sa mga strain ng bakuna ng mikrobyo ng salot, at maaaring magamit para sa paghahanda ng mga medikal na immunobiological na paghahanda.

Sa kasalukuyan sa Russia ang tanging gamot na ginagamit para sa tiyak na pag-iwas Ang salot ay isang live na dry plague na bakuna na binuo noong 1937...1939. batay sa strain ng bakuna EV ng linya ng NIIEG [Faibich M.M., Karneev R.V., 1947]. Pangmatagalang paggamit Ipinakita ito ng bakuna sa salot na live dry mataas na kahusayan na may cutaneous, intradermal, subcutaneous at inhalation na paraan ng pagbabakuna.

Gayunpaman, ang problema sa pagpapanatili ng mataas na immunogenic na katangian ng bakuna ay higit na tinutukoy ng katatagan biyolohikal na katangian bakuna strain ng salot microbe kasama sa komposisyon nito, hindi lamang sa proseso pangmatagalang imbakan, ngunit din sa mga teknolohikal na yugto ng produksyon ng gamot. Ang mga ginawang batch ng mga bakuna, gaya ng ipinapakita ng kasanayan, ay maaaring magkaiba sa isa't isa pisikal at kemikal na mga katangian, nilalaman ng mga buhay na microbial cell, thermal stability, natitirang kahalumigmigan, immunogenicity at iba pang mga indicator. Samakatuwid, ang paghahanap ng mga bagong paraan upang makakuha ng mga bakuna sa salot na nagpapabuti sa kanilang mga katangian ng kalidad ay isang kagyat na gawain sa kasalukuyang yugto.

May kilalang paraan ng pagkuha ng live na dry plague na bakuna batay sa EV strain ng NIIEG line, na ginamit sa NIPCH ng Stavropol [Mga regulasyon sa industriya. Numero ng pagpaparehistro FGUN GISK im. L.A. Tarasevich PR No. 2334-09]. Ang pamamaraan ay binubuo sa sunud-sunod na paghahanda ng mga kultura ng binhi ng I...III na henerasyon mula sa isang produksyon na lyophilized na kultura ng strain ng bakuna EV: I generation - sa pamamagitan ng paglaki sa mga test tube sa Hottinger agar slants, II generation - sa mga kutson (bote) na may Mas mainit na sabaw o sabaw batay sa enzymatic casein hydrolyzate (FHC) ), III generation - sa pamamagitan ng paglilinang sa isang liquid nutrient medium (LNM) sa mga bote, pagpapalaki ng katutubong kultura sa isang dense nutrient medium (DSM) sa isang AKM-Sh (reactor) , paghahanda ng isang suspensyon ng bakuna at isang tuyo na paghahanda.

Ang pinakamalapit sa inaangkin ay ang paraan ng paggawa ng dry live plague vaccine batay sa EV vaccine strain na ginamit sa 48th Central Research Institute ng Ministry of Defense ng Russia [Mga regulasyong pang-industriya para sa paggawa ng live plague vaccine lyophilisate para sa paghahanda ng suspensyon para sa iniksyon, paglanghap at aplikasyon ng scarification sa balat. PR 08461522-07-08. Naaprubahan noong Hunyo 3, 2009. Numero ng pagpaparehistro ng Federal State Budgetary Institution GISK na pinangalanan. L.A. Tarasevich PR No. 2120-09]. Ang pamamaraan ay binubuo sa sunud-sunod na paghahanda ng henerasyon I...III na mga seed culture mula sa production culture ng vaccine strain EV: I generation - sa pamamagitan ng lumalaking microbes sa mga test tube sa slanted EPS batay sa enzymatic hydrolyzate ng karne ng baka (FGM), II henerasyon - FGM-based EPS sa mga bote, III henerasyon - paglilinang sa ZhPS batay sa FGM sa mga bote, lumalaki ang katutubong kultura sa ZHPS, sa mga cultivator (reactors), konsentrasyon ng microbial suspension, paghahanda ng suspensyon ng bakuna gamit ang protective drying medium ng sumusunod na komposisyon:

lyophilization ng suspensyon ng bakuna ayon sa sumusunod na teknolohikal na rehimen:

temperatura ng condenser - minus (50…70)°C;

temperatura ng pagyeyelo ng materyal - minus 30°C;

vacuum sa drying chamber - hindi hihigit sa 300 µm Hg;

bilis ng pagpapatayo - 2°C h -1;

oras ng pagpapatayo -10 oras.

Ang karaniwan sa iminungkahing pamamaraan ay ang pagkakatulad ng pagkuha ng seed culture gamit ang paraan ng paglaki sa LPS batay sa FGM sa mga bote at pag-concentrate ng microbial suspension.

Ang mga pangunahing disadvantages ng prototype na paraan ay ang mga sumusunod.

1. Pagkuha ng tradisyonal na seed material, na kinabibilangan ng sunud-sunod na subculture sa solid at liquid nutrient media (mga seed culture ng I, II, III na henerasyon), na hindi ginagarantiyahan ang katatagan ng mga pangunahing biological properties at makabuluhang bawasan ang resistensya ng bakuna strain ng plague microbe sa aksyon panlabas na mga kadahilanan sa mga kasunod na yugto ng paghahanda ng isang puro suspensyon, suspensyon ng bakuna at tuyong anyo ng tapos na produkto.

2. Ang paggamit ng dextrin bilang isang bahagi ng proteksiyon na daluyan ng pagpapatayo, na, dahil sa mga proseso ng coagulation at karagdagang sedimentation na pinukaw ng pagkakalantad mataas na temperatura kapag autoclaving, humahantong sa isang artipisyal na pagtaas sa optical density kumpara sa orihinal. Ito ay higit pang nag-aambag sa kakulangan ng pagtatasa ng aktwal na konsentrasyon at sa pagtaas ng optical na konsentrasyon ng mga microbial cell nang direkta sa paghahanda ng bakuna. Ang mga pangyayari sa itaas ay humantong sa isang hindi kanais-nais na pagbaba sa isa sa ang pinakamahalagang tagapagpahiwatig kalidad ng live na bakuna sa salot - porsyento ng mga buhay na microbial cell.

3. Paggamit ng tradisyonal na paraan ng pagpapatuyo ng suspensyon ng bakuna na may mataas na pagkamatay ng mga mikrobyo sa ilalim ng mga kondisyon ng lyophilic stress.

Ang lahat ng mga kawalan sa itaas ay nangangailangan ng isang seryosong paghahanap para sa isang pinakamainam na pamamaraan para sa paghahanda ng inoculum, na tinitiyak ang pagpapapanatag ng mga pangunahing biological na katangian ng mga microbes sa maagang yugto paggawa ng bakuna, pag-optimize sa komposisyon ng bahagi ng daluyan ng pagpapatuyo para sa kumpletong proteksyon ng mga microbial cell bago ang lyophilization at pag-aalis ng mga posibleng teknikal na error sa pagtukoy ng konsentrasyon ng mga microbial cell sa yugto ng paghahanda ng suspensyon ng bakuna, pagbuo ng mga mode ng lyophilization upang mabawasan ang mga nakakapinsalang epekto mababang temperatura at dehydration sa microbial cells sa panahon ng proseso ng pagpapatuyo.

Ang layunin ng imbensyon ay upang bawasan ang tagal ng proseso ng pagkuha ng paghahanda ng bakuna habang sabay-sabay na pagtaas ng partikular na aktibidad nito.

Ang problema ay nalutas dahil sa ang katunayan na sa inaangkin na paraan ng paggawa ng mga bakuna ang mga sumusunod ay binuo at na-optimize (Talahanayan 1):

1. Scheme para sa pagkuha ng seed culture ng plague microbe strain, na kinabibilangan ng paglilinang ng passaged stabilized starter culture (PSSC) sa LPS sa mga bote.

Upang ihanda ang PSSC, ang isang ampoule na may reference culture ng plague microbe strain ay muling sinuspinde sa orihinal na dami nito sa distilled water, at pagkatapos ay ang sunud-sunod na tatlong-tiklop na testicular passage ng microbial culture ay isinasagawa sa pamamagitan ng katawan ng mga madaling kapitan na hayop (guinea pig). . Ang naipasa na microbial culture ay sterile na nakahiwalay sa katawan ng hayop at pinaghalo sa isang 2:1 ratio na may stabilizing liquid (glycerol, lactose at polyglucin). Ang inihandang PSSC, na nilayon para sa pagkuha ng seed culture sa mga bote, ay ibinubuhos sa mga bote ng 60...80 ml at nakaimbak sa frozen sa temperatura na minus 18...22°C.

Ang paglilinang ng mga mikrobyo sa FPS sa mga bote ay isinasagawa sa loob ng 48 oras sa temperatura na 26...28°C at tuluy-tuloy na aeration ng hindi bababa sa 10 l min -1. Sa pagtatapos ng paglilinang, ang biological control ng kultura ay isinasagawa at ito ay inilipat sa reaktor para sa paghahanda ng isang katutubong kultura.

Ang mga paghahambing na katangian ng mga katutubong kultura ng strain ng bakuna ng microbe ng salot, na inihanda ayon sa iminungkahing pamamaraan at ang prototype scheme, ay ipinakita sa Talahanayan 2.

2. Component composition ng protective drying medium: lactose, g l -1 - 300.0; thiourea, g l -1 - 30.0; ascorbic acid, g l -1 - 30.0; polyglucin, g l -1 - 30.0; distilled water, l - hanggang sa kinakalkula na dami, pH ng daluyan sa loob ng 7.4...7.8 na mga yunit. pH (Talahanayan 3).

Ang polyglucin (polysaccharide structure-forming agent) ay isang domestic dextran na nakuha sa pamamagitan ng direct synthesis. Ang molecular weight ng polyglucin ay (50...70) 10 3 units. Ang pagiging isang produkto ng bahagyang hydrolysis ng dextrin, ito ay may magkaparehong mga katangian, ngunit ito ay makabuluhang mas mababa sa molekular na timbang. Ang polyglucin ay chemically inert at halos hindi sumasama sa ibang mga substance. Ang pagiging hindi nakakapinsala, hindi nakakalason at walang pyrogen na mga katangian ng polyglucin ay napatunayan na sa pangmatagalan at matagumpay na paggamit nito sa larangan ng blood transfusiology. kawalan side effects sa katawan ng tao ay nagbibigay-daan sa paggamit nito bilang mga bahagi ng drying medium para sa mga bakuna.

Ang batayan ng epekto nito sa mga microbial cell ay ang proseso ng pag-stabilize ng conformational state ng mga molekula ng protina dahil sa pagpapanumbalik ng intramolecular hydrogen bond. Ang paggamit ng polyglucin bilang isang cryoprotectant ay maaaring makabuluhang bawasan ang pagkasira ng mga microbial cells sa panahon ng pagyeyelo at pag-aalis ng tubig sa panahon ng proseso ng lyophilization.

3. Teknolohikal na rehimen ng freeze drying ayon sa mga pangunahing parameter: temperatura ng condenser na minus 60°C, temperatura ng pagyeyelo ng materyal na minus 40°C, vacuum sa drying chamber (vacuum depth) na hindi hihigit sa 100 µm Hg, bilis ng pagpapatuyo 3°C h - 1, oras ng pagpapatayo 6 na oras (Talahanayan 3, Mga Figure 1-3).

Ang pagbawas sa tagal ng proseso ng paggawa ng bakuna, pagpapatatag ng mga biological na katangian ng mikrobyo ng salot sa mga yugto ng paghahanda ng mga semi-tapos na produkto ng bakuna at pagpapabuti ng mga katangian ng kalidad ng tuyong anyo ng gamot ay dahil sa:

1) isang pamamaraan para sa pagkuha ng isang kultura ng binhi ng isang strain ng bakuna ng microbe ng salot, na kinabibilangan ng paglilinang ng mga PSC sa ZhPS sa mga bote;

2) gamit ang isang protective drying medium na na-optimize para sa komposisyon ng bahagi nito;

3) lyophilization mode na na-optimize para sa pangunahing mga teknolohikal na parameter.

Relasyon ng sanhi-at-epekto sa pagitan ng mga hanay ng mahahalagang katangian ng inaangkin na bagay at nakamit na mga resulta ipinakita sa Talahanayan 4.

Ginagawang posible ng imbensyon na maghanda ng isang bakuna na nakakatugon sa mga kinakailangan at may matatag na biological properties sa kabuuan pinahihintulutang panahon imbakan

Ang posibilidad ng pagpapatupad ng inaangkin na imbensyon ay ipinapakita ng sumusunod na halimbawa.

Upang maghanda ng seed culture ng plague microbe, ang PSSC na nakaimbak sa sub-zero na temperatura ay idinaragdag sa isang FGM-based na LPS sa mga bote. Ang paglilinang ay isinasagawa sa loob ng 48 oras sa temperatura na 26...28°C at tuloy-tuloy na aeration ng hindi bababa sa 10 l min -1. Sa pagtatapos ng paglaki ng kultura sa mga bote, ito ay biologically na kinokontrol at inililipat sa mga reactor para sa paghahanda ng katutubong kultura. Ang paglilinang ng microbial suspension sa reactor ay isinasagawa sa pamamagitan ng pamamaraan ng malalim na paglilinang alinsunod sa mga kinakailangan ng [Mga regulasyon sa industriya. Numero ng pagpaparehistro ng FGUN GISK im. L.A. Tarasevich PR No. 2120-09].

Upang ihanda ang daluyan ng pagpapatayo, ang isang sample ng polyglucin ay unang ibinuhos na may 100...200 ml ng mainit na 40...50°C na distilled water at pinananatili sa loob ng 10...12 oras sa temperatura na 18...24° C. Ang nagresultang homogenous na solusyon ay sinala sa isang sterile na lalagyan sa pamamagitan ng isang gauze filter.

Ang isang sample ng lactose ay ibinuhos sa 500 ML ng distilled water at pinainit sa 80...90°C na may patuloy na pagpapakilos hanggang sa ganap na matunaw. Pagkatapos nito, ang nagresultang solusyon ay nahahati sa dalawang bahagi. Matunaw sa isang bahagi ascorbic acid, at sa iba pa - thiourea; Ang paglusaw ng thiourea ay isinasagawa sa temperatura na 70...80°C. Ang solusyon ng ascorbic acid ay neutralisado sa isang 40% NaOH na solusyon sa isang halaga ng 7.3...7.5 na mga yunit. pH. Ang mga inihandang solusyon ng thiourea at ascorbic acid ay sinala sa pamamagitan ng gauze filter at halo-halong may solusyon ng polyglucin. Ang pH value ng resultang timpla ay dapat nasa hanay na 7.2...7.6 units. pH. Ang halaga ng pH ay nababagay sa isang 10% NaOH na solusyon.

Upang ayusin ang optical density kapag naghahanda ng isang suspensyon ng bakuna, ang isang karagdagang solusyon ng drying medium ay inihanda din na may sangkap na nilalaman na 10 beses na mas mababa kaysa sa kanilang nilalaman sa pangunahing solusyon ng drying medium. Ang resultang drying medium ay isterilisado sa isang autoclave (umaagos na singaw - 40 minuto; sa 120°C - 20 minuto o sa pamamagitan ng pagsasala gamit ang mga yunit ng filter tulad ng "Sartorius" SM 16277 o "Sartokon-mini").

Gamit ang vacuum, ang isang drying medium ay idinagdag sa isang bote na may concentrated suspension ng plague microbe sa ratio na 2:1 (2 parts concentrated suspension, 1 part drying medium). Ang mga nilalaman ng bote ay lubusang pinaghalo sa pamamagitan ng pag-alog. Pagkatapos nito, ang isang sample ng suspensyon ng bakuna ay kinuha sa halagang 200...300 ml upang masuri ang mga biological na katangian nito. Ang suspensyon ng bakuna ay maaaring itago sa temperatura na 2...6°C nang hindi hihigit sa 4 na oras.

Ang suspensyon ng bakuna ay ibinubuhos sa mga sterile na penicillin vial, 2.0 ml bawat isa, gamit ang isang awtomatikong dispenser sa apoy ng isang lampara ng alkohol.

Isinasagawa ang freeze drying sa isang pag-install ng TG-16. Upang gawin ito, 3 oras bago mag-load, palamig ang mga istante ng silid sa temperatura na minus 40°C, at ang condenser sa temperatura na minus 60°C. Ang mga cuvettes na may mga vial ay naka-install sa mga istante 1-5 ng sublimator. Ang isang sensor ng temperatura ay ipinasok sa isa sa mga bote sa istante No. 1, 3, 5. Ang suspensyon ng bakuna ay nagyelo sa temperaturang minus 40°C. Matapos maabot ang tinukoy na temperatura, ang pagsususpinde ng bakuna ay pinananatili sa loob ng 2 oras. 1 oras pagkatapos lumikha ng isang ibinigay na halaga ng vacuum, ang mga heated na istante ay naka-on. Susunod, ang temperatura ay unti-unting tumaas sa 0°C. Ang bilis ng pagpapatuyo sa panahong ito ay 3°C h -1. Kapag ang temperatura sa materyal ay umabot sa 0°C, sa pamamagitan ng pag-init ng mga istante sa loob ng 6 na oras dinadala ito sa temperatura na 25...30°C. Ang bilis ng pagpapatayo sa panahong ito ay 5...6°C h -1 at ang pagpapatuyo ay isinasagawa sa temperaturang ito sa loob ng 6 na oras.

Ang mga paghahambing na katangian ng mga experimental production batch ng live dry plague vaccine na ginawa gamit ang inaangkin na paraan at ang prototype na paraan, pati na rin sa pangmatagalang imbakan, ay ipinakita sa Talahanayan 5 at 6.

Talahanayan 3
Mga paghahambing na katangian ng mga yugto ng teknolohikal na proseso para sa pagkuha ng bakuna sa salot
Pangalan ng yugto ng teknolohikal na proseso	Paglalarawan ng yugto ng teknolohikal na proseso
prototype (Industrial regulasyon PR No. 2120-09)	ipinahayag na bagay
TP - 14	Komposisyon ng pampatatag:	Komposisyon ng pampatatag:
Paghahanda ng pagsususpinde ng bakuna	lactose, g l -1 - 300;	lactose, g l -1 - 300;
	dextrin, g l -1 - 30;	polyglucin, g l -1 - 30;
Operasyon BP-14-5	thiourea, g l -1 - 30;	thiourea, g l -1 - 30;
Paghahanda ng stabilizer		ascorbic acid, g l -1 - 30;
		distilled water, l - hanggang sa kinakalkula na dami.
TP-15. Pagpuno ng suspensyon ng bakuna at freeze drying		Teknolohikal na mode ng pagpapatuyo ng sublimation ayon sa pangunahing mga parameter: temperatura ng condenser - minus 60 ° C;
Operasyon TP-15-8 I-freeze ang pagpapatuyo	temperatura ng pagyeyelo ng materyal - minus 30°C; vacuum sa drying chamber (vacuum depth) - hindi hihigit sa 300 µm Hg; bilis ng pagpapatuyo 2°C h -1 ; oras ng pagpapatayo 10 oras	materyal na nagyeyelong temperatura minus - 40°C; vacuum sa drying chamber (vacuum depth) - hindi hihigit sa 100 µm Hg; bilis ng pagpapatuyo 3°C h -1 ; oras ng pagpapatayo 6 na oras.

Talahanayan 4
Ang ugnayang sanhi-at-epekto sa pagitan ng mga hanay ng mahahalagang katangian ng iminungkahing bagay at ang mga resultang nakamit
Mga uri ng teknikal na resulta at ang kanilang mga sukat	Aktwal at kinakalkula na mga tagapagpahiwatig	Detalyadong paglalarawan kung ano ang nangyari posibleng pagpapabuti mga tagapagpahiwatig ng iminungkahing bagay kumpara sa prototype
prototype	ipinahayag na bagay
konsentrasyon ng microbial cell,			Paggamit ng isang optimized na bahagi ng komposisyon ng proteksiyon na drying medium at isang optimized teknolohikal na rehimen para sa freeze drying
bilyon ml -1: kabuuan (ayon sa TOC ng GISC turbidity)	90	75
live (paraan ng plato)	24,5	26,1
	27,2	34,8
Immunogenicity ED 50, l.m.cl., para sa:			Paggamit ng pasivated stabilized starter culture
puting daga	11350	9053
mga guinea pig	7360	5225
Pagbawas sa tagal ng proseso ng pagkuha ng bakuna, h	491	337	Paggamit ng passivated stabilized panimulang kultura at optimized freeze-drying teknolohikal na rehimen

Talahanayan 5
Mga paghahambing na katangian ng mga biological indicator ng live dry plague na bakuna sa pangmatagalang imbakan (X ¯ ± I 95 , n=5)
Serye ng bakuna na pinag-aaralan	Konsentrasyon ng microbes, N 10 9 m cells ml -1, natukoy ...	Porsiyento ng mga buhay na microbial cell	Scheme para sa pagkuha ng mga pananim na binhi
ayon sa TOC turbidity GISC na ipinangalan. L.A. Tarasevich	Paraan ng tasa
Bagong handa	75.0±4.0	26.1±2.3	34,8	Inangkin
Nakaimbak ng... taon	1	75.0±3.0	25.7±1.9	34,2
	2	75.0±2.0	25,4+2,6	33,8
	3	75.0±2.0	23.3±2.0	31,1
Bagong handa	90.0±2.0	24,5+1,3	27,2	Prototype
Nakaimbak ng... taon	1	90.0±2.0	23,8+1,5	26,4
	2	90.0±2.0	23.2±1.5	25,7
	3	90.0±2.0	22.5±1.8	25,0

Talahanayan 6
Mga katangian ng mga immunobiological na katangian ng pang-eksperimentong serye ng produksyon ng live dry plague vaccine
Marka ng Kalidad	Yunit ng pagsukat	Mga kinakailangan sa ND (Mga regulasyong pang-industriya PR No. 2120-09)	Mga resulta ng pag-aaral ng mga batch ng gamot na nakuha gamit ang...pamamaraan
inaangkin	prototype
Konsentrasyon ng mga microbial cell sa 1 ml:
sa pamamagitan ng TOC labo GISC	bilyon	Mula 50 hanggang 100	75	90
buhay	bilyon	-	26,1	24,5
Porsiyento ng mga buhay na microbial cell	porsyento	25.0, hindi bababa	34,8	27,2
		Ang gamot ay dapat
Partikular na hindi nakakapinsala	-	maging hindi nakakapinsala kapag pinangangasiwaan nang subcutaneously sa isang guinea pig na tumitimbang ng (275±25) g 15×10 9 microbial cells (m.c.) sa 1 ml ayon sa RSD ng turbidity GISC na pinangalanan. L.A. Tarasevich	Ang gamot ay hindi nakakapinsala kapag pinangangasiwaan nang subcutaneously sa isang guinea pig na tumitimbang ng (275±25) g 15×10 9 microbial cells (m.c.) sa 1 ml ayon sa RSD ng turbidity GISC na pinangalanan. L.A. Tarasevich
Immunogenicity (IU 50):		40000, wala na	9053	11350
para sa mga puting daga	f.m.cl.
para sa mga guinea pig		10000, wala na	5225	7360

Isang paraan para sa paggawa ng isang gamot batay sa isang strain ng bakuna ng isang microbe ng salot, na kinabibilangan ng paggawa ng katutubong binhi ng kultura ng isang mikrobyo ng salot, pag-concentrate ng isang microbial suspension, paghahanda ng isang suspensyon ng bakuna at pagkuha ng isang tuyo na anyo ng gamot, na nailalarawan sa Ang paghahanda ng kultura ng binhi ay kinabibilangan ng paglilinang ng mga mikrobyo sa isang likidong nutrient medium sa mga bote sa loob ng 48 h sa temperatura na 26...28˚С at tuluy-tuloy na pag-aeration ng hindi bababa sa 10 l min -1 na may isang naipasa na nagpapatatag na kultura ng starter na nakuha bilang isang resulta ng tatlong sunud-sunod na mga sipi sa pamamagitan ng katawan ng mga guinea pig at halo-halong sa isang 2: 1 ratio na may nagpapatatag na glycerol-lactose-polyglucin na likido, Kapag naghahanda ng isang suspensyon ng bakuna, ginagamit ang isang proteksiyon na daluyan ng pagpapatayo na na-optimize para sa komposisyon ng bahagi nito, kabilang ang: lactose, g l -1 - 300.0, thiourea, g l -1 - 30.0, ascorbic acid, g l -1 - 30.0; polyglucin, g l -1 - 30.0; distilled water, l - hanggang sa kinakalkula na dami, pH ng medium na 7.4...7.8, at lyophilization ay isinasagawa na sinusunod ang sumusunod na rehimen: temperatura ng condenser na minus 60°C, nagyeyelong temperatura ng materyal na minus 40°C, vacuum sa ang drying chamber (vacuum depth) na hindi hihigit sa 100 µm Hg, drying rate 3°C h -1 at drying time 6 hours.

Mga katulad na patent:

Ang imbensyon ay nauugnay sa biotechnology. Ang paraan para sa pagkuha ng spore material ng bacteria ng genus Clostridium ay nagsasangkot ng pagkuha ng inoculum ng bacteria sa isang kumpletong synthetic nutrient medium, paghahasik ng inoculum at pag-culture nito sa angkop na kondisyon sa isang nutrient medium kabilang ang patatas, glucose, ammonium sulfate at chalk.

Ang imbensyon ay nauugnay sa biotechnology. Isang samahan ng mga strain ng oil-degrading bacteria na nakahiwalay sa oil-contaminated soil, Acinetobacter species B-1037, Pseudomonas species B-989, Bacillus species B-1040, na idineposito sa Federal Budgetary Institution State Research Center para sa Virology at Biochemistry "Vector" ay iminungkahi.

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng biotechnology. Ang Bacillus subtilis subsp.subtilis BKM B-2711D strain ay nagpahayag ng antagonism laban sa Escherichia coli, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, paglaban sa antibiotics streptomycin at tetracycline.

Ang bakunang ito ay inuri bilang isang live na bakuna, dahil ito ay inihanda batay sa isang attenuated strain ng plague microbe EV, na nahiwalay noong 1926 sa isla ng Madagascar mula sa isang batang lalaki na namatay mula sa bubonic na salot. Ang virulence ng microbe na ito ay nabawasan nang husto sa pamamagitan ng mga sipi sa agar media sa temperatura na 18-20°C na may buwanang subculture sa loob ng 5 taon. Kapag gumagawa ng isang bakuna, ang kultura ng ina ng strain ng bakuna, na nakaimbak sa isang lyophilized na estado sa hanay ng temperatura -25°C (mas mabuti) + 6°C, pagkatapos ng animalization nito (pagdaraan sa katawan guinea pig) at kasunod na paghahanda - pagsasanay sa likido at solidong nutrient media at pagsuri sa pagiging kapaki-pakinabang ng mga katangian nito - ay inihahasik sa malalaking volume ng siksik nutrient medium, halimbawa, Hottinger agar sa cuvettes, at lumaki sa mga espesyal na awtomatikong microbial cultivator (AKM-III). Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog sa temperatura na 28°C sa loob ng 40-42 na oras, ang kulturang lumaki sa ibabaw ng daluyan ay hinuhugasan gamit ang isang drying medium - isang solusyon na naglalaman ng sucrose, gelatin, monosodium glutamate, thiourea at peptone, isang suspensyon ng EV Ang bakterya ay inililipat sa mga bote, diluted na may isang drying medium sa ilalim ng kontrol ng isang optical standard turbidity sa isang konsentrasyon ng 60-80 bilyon microbes sa 1 ml, ibinuhos sa ampoules at lyophilized.

Kasama nito, posibleng makakuha ng vaccine strain biomass sa liquid media sa pamamagitan ng pagpapalaki nito sa cultivator reactors. Sa kasong ito, ang seed culture ay idinagdag sa 100 litro ng sterile Hottinger broth at incubated sa ilalim ng mga kondisyon ng tuluy-tuloy na aeration at pagpapakilos sa 28-30 ° C hanggang sa simula ng nakatigil na yugto ng microbial growth, kapag ang kanilang bilang ay umabot sa 30-50 bilyon. bawat ml at humihinto sa pagtaas. Karaniwan itong nangyayari pagkatapos ng 18-24 na oras ng paglilinang. Upang mapabilis ang rate ng paglago ng mga mikrobyo, pinapakain sila ng isang 40% na solusyon ng glucose. Pagkatapos ang reaktor ay pinalamig, ang kultura ng sabaw ay inilalagay sa isang refrigerator sa 0-6 ° C nang hindi hihigit sa 48 oras, ang supernatant ay pinatuyo, ang naayos na masa ng mga mikrobyo ay natunaw na may isang daluyan ng pagpapatayo sa isang konsentrasyon ng 80 bilyong microbes bawat 1 ml, ibinuhos sa ampoules at lyophilized.

Pagkatapos nito, ang pinatuyong bakuna ay sinusubaybayan para sa:

Espesyal na sterility;

Konsentrasyon ng mikrobyo;

Bilang ng mabubuhay na mikrobyo;

Bilang ng mga dosis ng tao;

Mga katangiang pisikal;

Kawalang-kapinsalaan;

Immunogenicity.

Kung ang mga resulta ng mga control study ay nakakatugon sa mga nakalistang kinakailangan, ang bakuna ay ginagamit para sa mga pagbabakuna laban sa salot.

Ang mga pagbabakuna na may live plague vaccine ay isinasagawa sa ilalim ng balat gamit ang isang syringe o gamit ang isang walang karayom ​​na injector. Ang mga batang wala pang 7 taong gulang, mga buntis at matatanda ay nabakunahan sa ilalim ng balat, tulad ng pagbabakuna laban sa bulutong.

Ang mga bata, kabataan at matatanda ay nabakunahan ng isang beses na may iba't ibang dosis, na nakasaad sa mga tagubilin para sa paggamit ng bakuna.

Ang buhay ng istante ng bakuna, sa kondisyon na ito ay maayos na naihatid (sa temperatura na hindi hihigit sa 10°C) at nakaimbak sa isang tuyo, madilim na lugar sa temperaturang 1 hanggang 6°C, ay hanggang 3 taon. Dapat tandaan na kung ang bakuna ay dinala at iniimbak sa 20-25°C, ang buhay ng istante nito ay hindi lalampas sa 2 buwan.