Mga antibodies, na matatagpuan sa ibabaw ng mga erythrocytes, ay maaaring nasa static o libreng estado sa plasma ng dugo. Depende sa estado ng mga antibodies, ang isang direkta o hindi direktang reaksyon ng Coombs ay isinasagawa. Kung may dahilan upang maniwala na ang mga antibodies ay naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, isang direktang pagsusuri sa Coombs ay isinasagawa. Sa kasong ito, ang pagsubok ay nagaganap sa isang yugto - pagdaragdag antiglobulin serum. Kung ang mga hindi kumpletong antibodies ay naroroon sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, aglutinasyon pulang selula ng dugo

Hindi direktang reaksyon

Ang hindi direktang reaksyon ng Coombs ay nangyayari sa 2 yugto. Una kailangan mong artipisyal na ipatupad sensitization pulang selula ng dugo Upang gawin ito, ang mga pulang selula ng dugo at ang serum ng dugo na sinusuri ay incubated, na nagiging sanhi ng pag-aayos ng mga antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Pagkatapos kung saan ang ikalawang yugto ng pagsubok ng Coombs ay isinasagawa - ang pagdaragdag ng antiglobulin serum.

Reaksyon ng ulan - Ang RP (mula sa Latin na praecipilo to precipitate) ay ang pagbuo at pag-ulan ng isang complex ng natutunaw na molekular antigen na may mga antibodies sa anyo ng cloudiness, na tinatawag na umuulan. Ito ay nabuo sa pamamagitan ng paghahalo ng mga antigen at antibodies sa katumbas na dami; Ang reaksyon ng pag-ulan ay ginagawa sa mga test tubes (ring precipitation reaction), sa mga gel, nutrient media, atbp. Mga uri ng precipitation reaction sa isang semi-liquid agar o agarose gel, double immunodiffusion sa pamamagitan ng Ouchterlony, radiap immunodiffusion, immunoepectrophoresis atbp.

Pag-type ng HLA- pag-aaral ng human major histocompatibility complex - HLA complex. Kasama sa pagbuo na ito ang isang rehiyon ng mga gene sa chromosome 6 na nag-encode ng mga HLA antigens na kasangkot sa iba't ibang immune response.

Mga gawain para sa Pag-type ng HLA maaaring ibang-iba - biological identification (ang uri ng HLA ay minana kasama ng mga gene ng magulang), pagpapasiya ng predisposisyon sa iba't ibang sakit, pagpili ng mga donor para sa paglipat ng organ - kabilang dito ang paghahambing ng mga resulta ng pag-type ng HLA ng mga tisyu ng donor at tatanggap. Gamit ang pag-type ng HLA, natutukoy kung gaano magkatulad o magkaibang mga mag-asawa sa mga tuntunin ng mga antigen ng histocompatibility upang masuri ang mga kaso ng kawalan ng katabaan.

Iminumungkahi ng pag-type ng HLA Pagsusuri ng HLA polymorphism at isinasagawa sa pamamagitan ng dalawang pamamaraan - serological at molecular genetic. Ang klasikong serological na paraan ng pag-type ng HLA ay batay sa isang microlymphocytotoxic na pagsubok, at ang molecular method ay gumagamit ng PCR (polymerase chain reaction).

Serological Pag-type ng HLA isinasagawa sa mga nakahiwalay na populasyon ng cell. Ang pangunahing histocompatibility complex antigens ay pangunahing dinadala ng mga lymphocytes. Samakatuwid, ang isang suspensyon ng T lymphocytes ay ginagamit bilang pangunahing mga carrier ng class I antigens, at isang suspensyon ng B lymphocytes upang matukoy ang HLA class II antigens. Upang ihiwalay ang mga kinakailangang populasyon ng cell mula sa buong dugo, ginagamit ang alinman sa centrifugation o immunomagnetic separation. Ito ay pinaniniwalaan na ang unang paraan ay maaaring humantong sa maling-positibong data, dahil nagreresulta ito sa pagkamatay ng ilang mga cell. Ang pangalawang paraan ay kinikilala bilang mas tiyak - higit sa 95% ng mga cell ay nananatiling mabubuhay.

Ngunit ang batayan para sa pagsasagawa ng lymphocytotoxic test Pag-type ng HLA ay isang tiyak na serum na naglalaman ng mga antibodies sa iba't ibang allelic variant ng HLA class I at II antigens. Maaaring matukoy ng serological test ang uri ng HLA sa pamamagitan ng pagsusuri kung aling sera ang tumutugon sa mga lymphocyte at alin ang hindi.

Kung ang isang reaksyon ay nangyayari sa pagitan ng mga cell at serum, ang resulta ay ang pagbuo ng isang antigen-antibody complex sa ibabaw ng cell. Pagkatapos magdagdag ng solusyon na naglalaman ng pandagdag, nangyayari ang cell lysis at kamatayan. Ang serological HLA typing test ay tinasa gamit ang fluorescence microscopy upang suriin ang positibo (pulang fluorescence) at negatibong (berdeng fluorescence) na reaksyon, o phase-contrast microscopy upang mantsang ang nuclei ng mga patay na selula. Ang resulta ng pag-type ng HLA ay nakuha na isinasaalang-alang ang pagtitiyak ng reacted sera at cross-reacting na mga grupo ng antigens, at ang intensity ng cytotoxicity reaksyon.

Mga disadvantages ng serological Pag-type ng HLA ay ang pagkakaroon ng mga cross-reaksyon, mahinang antibody affinity o mababang pagpapahayag ng HLA antigens, ang kawalan ng mga produktong protina sa isang bilang ng HLA genes.

Mas moderno mga pamamaraan ng molekular Pag-type ng HLA gumagamit sila ng naka-standardized na mga sintetikong sample na hindi tumutugon sa mga antigen sa ibabaw ng mga leukocytes, ngunit sa DNA at direktang nagpapahiwatig kung aling mga antigen ang naroroon sa sample. Ang mga molecular na pamamaraan ay hindi nangangailangan ng buhay na mga puting selula ng dugo; ang anumang selula ng tao ay maaaring pag-aralan, at ang ilang microliter ng dugo ay sapat na upang gumana, o maaari mong limitahan ang iyong sarili sa pag-scrape mula sa oral mucosa.

Molecular genetic Pag-type ng HLA gumagamit ng paraan ng PCR, ang unang hakbang kung saan ay upang makakuha ng purong genomic DNA (mula sa buong dugo, suspensyon ng leukocyte, mga tisyu).

Ang sample ng DNA ay kinokopya - pinalaki sa vitro gamit ang mga primer (maikling single-stranded DNA) na partikular sa isang partikular na HLA locus. Ang mga dulo ng bawat pares ng panimulang aklat ay dapat na mahigpit na pantulong sa natatanging pagkakasunud-sunod na naaayon sa isang partikular na allele, kung hindi ay hindi magaganap ang amplification.

Pagkatapos ng PCR, sa paulit-ulit na pagkopya, lumalabas ito malaking bilang Mga fragment ng DNA, na maaaring masuri nang biswal. Upang gawin ito, ang mga mixture ng reaksyon ay sasailalim sa electrolysis o hybridization, at kung ang partikular na amplification ay naganap ay tinutukoy gamit ang isang programa o talahanayan. Ang resulta ng pag-type ng HLA ay ipinakita sa anyo ng isang komprehensibong ulat sa mga antas ng gene at allelic. Dahil sa standardisasyon ng mga sample na ginamit, molekular Pag-type ng HLA mas tiyak na serological. Bilang karagdagan, nagbibigay ito ng higit pang impormasyon (mas bagong DNA alleles) at higit pa mataas na antas ang detalye nito, dahil ginagawang posible na makilala hindi lamang ang mga antigen, kundi pati na rin ang mga alleles mismo, na tumutukoy kung aling antigen ang naroroon sa cell.

Reaksyon ng immune lysis. Ang reaksyon ay batay sa kakayahan ng mga tiyak na antibodies na bumuo ng mga immune complex na may mga selula, kabilang ang mga erythrocytes at bakterya, na humahantong sa pag-activate ng sistema ng pandagdag sa kahabaan ng klasikal na landas at cell lysis. Sa mga reaksyon ng immune lysis, ang reaksyon ng hemolysis ay kadalasang ginagamit at ang reaksyon ng bacteriolysis ay bihirang ginagamit (pangunahin sa pagkita ng kaibahan ng kolera at tulad ng kolera na vibrios).

Reaksyon ng hemolysis. Sa ilalim ng impluwensya ng isang reaksyon na may mga antibodies sa pagkakaroon ng pandagdag, ang isang maulap na suspensyon ng mga pulang selula ng dugo ay nagiging maliwanag na pula. malinaw na likido- "lacquer blood" dahil sa paglabas ng hemoglobin. Kapag nagse-set up ng diagnostic complement fixation reaction (CFR), ang hemolysis reaction ay ginagamit bilang indicator: upang subukan ang presensya o kawalan (fixation) ng libreng complement.

Lokal na hemolysis reaksyon sa gel(Erne reaction) ay isa sa mga variant ng hemolysis reaction. Pinapayagan ka nitong matukoy ang bilang ng mga cell na bumubuo ng antibody. Ang bilang ng mga cell na naglalabas ng antibodies - mga hemolysin - ay tinutukoy ng bilang ng mga hemolysis plaque na lumilitaw sa isang agar gel na naglalaman ng mga erythrocytes, isang suspensyon ng mga selula ng lymphoid tissue na pinag-aaralan at pinupunan.

Immunofluorescent na pamamaraan

(RIF, immunofluorescence reaction) ay isang paraan para sa pag-detect ng mga partikular na Ags (Abs) gamit ang Abs (Ags) na pinagsama sa isang fluorochrome. Ito ay may mataas na sensitivity at pagtitiyak. Ginagamit para sa express diagnosis ng mga impeksiyon. mga sakit (pagkilala sa pathogen sa materyal ng pananaliksik), pati na rin para sa pagpapasiya ng Ab at mga receptor sa ibabaw at mga marker ng leukocytes (immunophenotyping) at iba pang mga cell. Direktang I. m. binubuo ng pagproseso ng isang seksyon ng tissue o isang pahid mula sa pathological na materyal o microbial crust na naglalaman ng mga tiyak na Abs conjugated na may fluorochrome; ang paghahanda ay hinuhugasan upang mapalaya ito mula sa hindi nakatali na Abs at sinusuri sa ilalim ng fluorescence microscope. Sa mga positibong kaso, lumilitaw ang isang kumikinang na immune complex sa paligid ng paligid ng bagay. Kinakailangan ang kontrol upang ibukod ang hindi tiyak na luminescence. Sa hindi direkta. I. m. sa unang yugto, ang isang tissue section o smear ay ginagamot sa isang non-fluorescent specific agent, sa pangalawa - na may luminescent agent laban sa -globulins ng hayop na ginamit sa unang yugto. Sa positibong kaso, isang luminous complex ang nabuo, na binubuo ng Ar, At to it at At laban sa At (sandwich method). Bilang karagdagan sa isang fluorescent microscope, ang RIF ay ginagamit upang isaalang-alang ang phenotyping ng mga cell. laser cell sorter .

Daloy ng cytometry- isang paraan ng optical na pagsukat ng mga parameter ng isang cell, ang mga organelle nito at ang mga prosesong nagaganap dito.

Ang pamamaraan ay nagsasangkot ng pag-detect ng scattering ng liwanag mula sa isang laser beam habang ang isang cell ay dumadaan dito sa isang stream ng likido, at ang antas ng light dispersion ay nagpapahintulot sa isa na makakuha ng ideya ng laki at istraktura ng cell. Bilang karagdagan, isinasaalang-alang ng pagsusuri ang antas ng fluorescence ng mga kemikal na compound na bahagi ng cell (autofluorescence) o idinagdag sa sample bago ang daloy ng cytometry.

Ang cell suspension, na may pre-label na fluorescent monoclonal antibodies o fluorescent dyes, ay pumapasok sa fluid stream na dumadaan sa flow cell. Ang mga kundisyon ay pinili sa paraan na ang mga cell line up ng isa-isa dahil sa tinatawag na. hydrodynamic na pagtutok ng jet sa jet. Sa sandaling tumawid ang isang cell sa laser beam, naitala ng mga detector:

light scattering sa maliliit na anggulo (mula 1° hanggang 10°) ( katangiang ito ginagamit upang matukoy ang laki ng cell).

light scattering sa isang anggulo na 90° (nagbibigay-daan sa amin na hatulan ang ratio ng nucleus/cytoplasm, pati na rin ang heterogeneity at granularity ng mga cell).

ang intensity ng fluorescence sa pamamagitan ng ilang mga channel ng fluorescence (mula 2 hanggang 18-20) - nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang komposisyon ng subpopulasyon ng suspensyon ng cell, atbp.

Prinsipyo ng antiglobulin. Ang mga anti-erythrocyte antibodies ng hindi kumpletong uri at mga complement molecule (C) na matatagpuan sa ibabaw ng mga erythrocytes ay nakita - isang direktang pagsubok - sa pamamagitan ng kanilang agglutination sa pakikipag-ugnay sa serum ng hayop na naglalaman ng mga antibodies sa antiglobulin ng tao (antiglobulin serum). Ang mga hindi kumpletong antibodies na libre sa suwero ay nakita - isang hindi direktang pagsubok - sa pamamagitan ng paglakip sa kanila sa isang halo ng normal na pangkat 0 erythrocytes, ang lahat ng mga antigen ay nabibilang sa kilalang Rh system, at pagkatapos ay pinagsama-sama sa ilalim ng impluwensya ng antiglobulin serum.

Mga materyales, reagents para sa Coombs antiglobulin test: test tubes 10/100 ml; nagtapos na mga pipette 1, 2 ml; Pasteur pipettes; mga tripod; unground glass slide; 8.5‰ NaCl solution; pulang selula ng dugo. Ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente, gayundin ang mga kabilang sa pangkat 0, ay makukuha mula sa bagong iginuhit na dugo gamit ang isang anti-clotting agent (EDTA solution).

Ang pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo ay dapat piliin sa paraang nagmula sila sa mga normal na indibidwal at naglalaman ng lahat Rh antigens. Maaari silang maiimbak ng hanggang 7 araw sa autologous plasma sa + 4°C. Sa kawalan ng pangkat 0 na pulang selula ng dugo, isang kilalang antigenic mosaic, isang halo ng pangkat 0 na pulang selula ng dugo, Rh-positibo at Rh-negatibong pulang selula ng dugo ay maaaring gamitin.

Serum ang pasyente ay dapat na bagong napili.

Antiglobulin serum ginawa ng Institute. Dr. I. Cantacuzino, ay magagamit sa lyophilized form sa 1 ml ampoules. Pagkatapos matunaw, itabi ang serum sa -20°C.

Coombs antiglobulin test technique:
A) Direktang pagsubok ng Coombs: Banlawan ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ng 3 beses gamit ang 8.5‰ NaCl solution.
Maglagay ng isang malaking patak ng antiglobulin serum dilutions sa ilang mga glass slide, at sa tabi ng mga ito, isang maliit na patak mula sa erythrocyte sediment ng pasyente; ihalo ang mga patak sa sulok ng baso. Iwanan ang handa na materyal sa mesa sa loob ng 5 minuto, pagkatapos ay suriin para sa pagkakaroon ng mga agglutinates. Kung positibo ang resulta, tukuyin ang maximum agglutinating titer.

b) Hindi direktang pagsubok ng Coombs: erythrocytes ng grupo 0, Rh-positive at Rh-negative, banlawan ng 3 beses na may 8.5‰ NaCl solution at ilantad sa serum ng pasyente sa rate na 2 patak ng erythrocytes bawat 8-10 patak ng serum, pagkatapos ay i-incubate sa loob ng 60 minuto sa temperaturang 37° MAY. Pagkatapos nito, hugasan muli ang mga pulang selula ng dugo ng tatlong beses at gamutin ang mga ito ng antiglobulin serum, ayon sa mga tagubilin para sa direktang pagsubok Coombs.

Pagdating tungkol sa malamig na aktibong antibodies gawing sensitize ang pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo sa loob ng 60 minuto. sa temperatura na + 4°C.

Tandaan: 1) Huwag magsagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs sa mga pulang selula ng dugo na nakaimbak ng isa o higit pang araw sa + 4°C o temperatura ng silid, dahil ang mga resulta ay maaaring lumabas na false positive dahil sa pag-aayos ng hindi kumpletong cold-active antibodies na nasa normal na serum. 2) Sa mga kaso ng matinding hyperproteinemia, hugasan ang mga pulang selula ng dugo 4-5 beses at suriin ang kawalan ng mga protina ng serum sa huling washing liquid gamit ang sulfosalicylic acid.

Ang isang posibleng nalalabi ng 2 μg IgG/ml sa erythrocyte sediment ay maaaring neutralisahin ang serum ng antiglobulin. Ang Coombs test ay maaari ding isagawa gamit ang monospecific anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 at -C4 sera upang linawin ang uri ng mga selula na matatagpuan sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, halimbawa, sa mga pasyenteng dumaranas ng autoimmune hemolytic anemya.

Pagsubok sa Coombs

Pagsubok sa Coombs– isang antiglobulin test na naglalayong tukuyin sa Rh-negative na dugo ang hindi kumpletong anti-erythrocyte antibodies sa Rh factor - isang partikular na protina na matatagpuan sa ibabaw ng erythrocytes ng Rh-positive na dugo. Mayroong dalawang uri ng pagsusulit na ito: direktang - pagtuklas ng mga antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, hindi direktang - pagtuklas ng mga antibodies sa serum ng dugo. Ang direktang pagsusuri ay isinasagawa sa pagsusuri at pagsubaybay sa paggamot ng mga sakit sa dugo: hemolytic anemia, sakit na hemolytic mga bagong silang at iba pa. Hindi direktang sample ay isinasagawa upang masuri ang pagiging tugma ng dugo ng donor at tatanggap sa panahon ng pagsasalin, pati na rin upang matukoy ang presensya at panganib ng Rh conflict kapag nagpaplano at namamahala sa pagbubuntis. Ang materyal para sa pagsusulit ng Coombs ay venous blood, ang pag-aaral ay isinasagawa gamit ang mga pamamaraan batay sa reaksyon ng aglutinasyon. Karaniwan, ang parehong mga pagsubok ay nagbibigay negatibong resulta. Ang pagsusuri ay nakumpleto sa loob ng isang araw.

Pagsubok sa Coombs - klinikal na pagsubok Rh-negative na dugo, na naglalayong makita ang mga antibodies sa Rh factor. Ang pagsusulit ay ginagamit upang matukoy ang panganib na magkaroon ng Rh conflict at hemolytic reactions. Sa bawat tao, ang ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ay naglalaman ng isang tiyak na hanay ng mga antigens o agglutinogens - mga compound ng iba't ibang kalikasan, ang presensya o kawalan nito ay ginagamit upang matukoy ang uri ng dugo at Rh factor. Mayroong maraming mga uri ng antigens, sa medikal na kasanayan ang pinakamalaki praktikal na kahalagahan may mga agglutinogens A at B, na tumutukoy sa pangkat ng dugo, at agglutinogen D, na tumutukoy sa Rh factor. Sa isang positibong Rh factor, ang mga D antigens ay nakikita sa panlabas na lamad ng mga erythrocytes, ngunit sa isang negatibong kadahilanan, sila ay hindi.

Ang Coombs test, na tinatawag ding antiglobulin test, ay naglalayong makita ang hindi kumpletong anti-erythrocyte antibodies sa Rh factor system sa dugo. Ang mga antibodies sa Rh factor ay mga partikular na immunoglobulin na nagagawa sa Rh-negative na dugo kapag ang mga pulang selula ng dugo na may mga agglutinogens D ay pumasok dito. Ito ay maaaring mangyari kapag ang dugo ng fetus at ang buntis ay naghalo, sa panahon ng pagsasalin ng dugo nang walang paunang dugo pagta-type. Ang pagsubok ng Coombs ay umiiral sa dalawang bersyon - direkta at hindi direkta. Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ay nakita. Ang pag-aaral ay ginagamit upang matukoy ang sanhi ng hemolytic reaction. Ang indirect Coombs test ay naglalayong makita ang mga anti-erythrocyte antibodies sa plasma ng dugo. Ito ay kinakailangan upang matukoy ang pagiging tugma ng dugo sa pagitan ng donor at tatanggap o ina at fetus, at tumutulong na maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict at kasunod na hemolysis ng mga pulang selula ng dugo.

Ang dugo para sa parehong bersyon ng Coombs test ay kinuha mula sa isang ugat. Ang pagsusuri ay isinasagawa sa pamamagitan ng agglutination gamit ang antiglobulin serum. Ang mga resulta ng pag-aaral ay ginagamit sa hematology upang matukoy ang mga sanhi ng hemolytic reaksyon, sa operasyon at resuscitation kapag nagsasagawa ng pagsasalin ng dugo, sa obstetrics at ginekolohiya kapag sinusubaybayan ang pagbubuntis sa mga babaeng may Rh-negative na dugo.

Mga indikasyon

Ang direktang pagsusuri ng Coombs, na nakakakita ng mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, ay inireseta para sa mga reaksiyong hemolytic (pagkasira ng mga pulang selula ng dugo) ng iba't ibang pinagmulan. Ang pag-aaral ay ipinahiwatig para sa pangunahing autoimmune hemolytic anemia, post-transfusion hemolytic anemia, hemolytic disease ng bagong panganak, hemolysis ng erythrocytes na dulot ng autoimmune, tumor o mga nakakahawang sakit, pati na rin ang pagtanggap mga gamot, halimbawa, quinidine, methyldopa, procainamide. Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs, na tumutukoy sa mga antibodies sa plasma ng dugo, ay ginagamit upang maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict. Ito ay ipinahiwatig para sa mga pasyente bilang paghahanda para sa pagsasalin ng dugo, gayundin para sa mga buntis na kababaihan na may negatibong Rh factor, sa kondisyon na hinaharap na ama ang bata ay may positibong Rh factor.

Upang matukoy ang Rh compatibility, ang Coombs test ay hindi inireseta sa mga pasyenteng may Rh positibong dugo. Sa mga kasong ito, mayroon nang mga antigen sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ang paggawa ng mga antibodies ay hindi maaaring pukawin ng pagsasalin ng dugo o pagpasok ng dugo ng pangsanggol sa daluyan ng dugo ng buntis. Gayundin, ang pag-aaral ay hindi ipinahiwatig para sa mga buntis na kababaihan kung ang parehong mga magulang ay may negatibong Rh factor - isang minanang recessive na katangian. Ang isang bata sa gayong mga mag-asawa ay palaging mayroon Rh negatibong dugo, imposible ang immunological conflict sa ina. Sa hemolytic pathologies, ang antiglobulin test ay hindi ginagamit upang subaybayan ang tagumpay ng therapy, dahil ang mga resulta ay hindi sumasalamin sa aktibidad ng proseso ng pagkasira ng mga pulang selula ng dugo.

Ang isang limitasyon ng pagsubok ng Coombs ay ang pagiging matrabaho ng pamamaraan ng pananaliksik - upang makakuha ng maaasahang mga resulta, kinakailangan na sumunod sa mga kondisyon ng temperatura at oras, mga patakaran para sa paghahanda ng mga reagents at biomaterial. Kasama sa mga bentahe ng Coombs test ang mataas na sensitivity nito. Sa hemolytic anemia, ang mga resulta ng pagsusulit na ito ay nananatiling positibo, kahit na ang mga antas ng hemoglobin, bilirubin at reticulocyte ay normal.

Paghahanda para sa pagsusuri at pagkolekta ng materyal

Ang materyal na ginamit sa pagsasagawa ng Coombs test ay venous blood. Walang mga espesyal na kinakailangan para sa oras ng pamamaraan ng sampling ng dugo at para sa paghahanda ng pasyente. Tulad ng anumang pag-aaral, inirerekumenda na magpahinga pagkatapos kumain ng hindi bababa sa 4 na oras, at huminto sa paninigarilyo sa huling 30 minuto. pisikal na aktibidad, iwasan ang emosyonal na stress. Dapat ding talakayin nang maaga sa iyong doktor ang pangangailangang huminto sa pag-inom ng mga gamot - maaaring sirain ng ilang gamot ang mga resulta ng pagsusuri sa Coombs. Ang dugo ay kinuha gamit ang isang hiringgilya mula sa cubital vein, mas madalas mula sa ugat sa likurang bahagi mga brush Sa loob ng ilang oras, ang materyal ay naihatid sa laboratoryo.

Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang antiglobulin serum ay idinaragdag sa serum ng dugo ng pasyente. Pagkaraan ng ilang oras, ang halo ay sinusuri para sa pagkakaroon ng mga agglutinates - sila ay nabuo kung mayroong mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo. Kung positibo ang resulta, tinutukoy ang agglutinating titer. Ang indirect Coombs test ay binubuo ng higit pa mga yugto. Una, ang mga antibodies na naroroon sa serum ay naayos sa mga iniksyon na pulang selula ng dugo sa panahon ng pagpapapisa ng itlog. Pagkatapos ang antiglobulin serum ay idinagdag sa sample, pagkatapos ng ilang oras ang presensya at titer ng mga agglutinates ay natutukoy. Ang panahon ng pagsusuri ay 1 araw.

Mga normal na resulta

Karaniwan, ang resulta ng direktang pagsusuri sa Coombs ay negatibo (-). Nangangahulugan ito na walang mga antibodies na nauugnay sa mga pulang selula ng dugo sa dugo, at hindi sila maaaring maging sanhi ng hemolysis. Normal na resulta Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay negatibo din (-), ibig sabihin, walang mga antibodies sa Rh factor sa plasma ng dugo. Kapag naghahanda para sa pagsasalin ng dugo para sa tatanggap, nangangahulugan ito ng pagiging tugma sa dugo ng donor kapag sinusubaybayan ang pagbubuntis, nangangahulugan ito ng kawalan ng Rh sensitization ng ina, isang mababang panganib na magkaroon ng isang immunological conflict. Physiological na mga kadahilanan, tulad ng mga gawi sa pagkain o pisikal na aktibidad, ay hindi makakaapekto sa resulta ng pagsusulit. Samakatuwid, kung positibo ang resulta, kinakailangan ang konsultasyon ng doktor.

Diagnostic na halaga ng pagsusuri

Ang isang positibong resulta ng pagsusulit sa Coombs ay ipinahayag nang husay, mula sa (+) hanggang (++++), o sa dami, ng mga titer mula 1:16 hanggang 1:256. Ang pagpapasiya ng konsentrasyon ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo at sa serum ng dugo ay isinasagawa sa parehong uri ng mga sample. Kung positibo ang direktang pagsusuri ng Coombs, ang mga antibodies ay makikita sa panlabas na lamad ng mga pulang selula ng dugo, na humahantong sa pagkasira ng mga selula ng dugo na ito. Ang sanhi ay maaaring pagsasalin ng dugo nang walang paunang pag-type - post-transfusion hemolytic reaksyon, pati na rin ang erythroblastosis ng bagong panganak, hemolytic reaksyon dahil sa paggamit ng mga gamot, pangunahin o pangalawang autoimmune hemolytic anemia. Ang pangalawang pagkasira ng mga pulang selula ng dugo ay maaaring sanhi ng systemic lupus erythematosus, Evans syndrome, Waldenström macroglobulinemia, paroxysmal cold hemoglobinuria, talamak na lymphocytic leukemia, lymphoma, nakakahawang mononucleosis, syphilis, mycoplasma pneumonia.

Ang isang positibong resulta ng hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa Rh factor sa plasma. Sa pagsasagawa, nangangahulugan ito na ang Rh sensitization ay naganap, at may posibilidad na magkaroon ng Rh conflict pagkatapos ng pagbubuhos ng donor blood sa panahon ng pagbubuntis. Upang maiwasan ang mga komplikasyon sa pagbubuntis, ang mga babaeng may positibong resulta ng pagsusuri sa Coombs ay inilalagay sa isang espesyal na rehistro.

Paggamot ng mga abnormalidad

Ang Coombs test ay tumutukoy sa isoserological studies. Ginagawang posible ng mga resulta nito na makilala ang isang hemolytic na reaksyon, pati na rin matukoy ang pagiging tugma ng dugo ng donor at tatanggap, ina at fetus, upang maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict. Kung positibo ang resulta ng pagsusuri, kailangan mong humingi ng payo mula sa iyong dumadating na manggagamot - obstetrician-gynecologist, hematologist, surgeon.

Sa maraming umiiral na antigens sa medikal na kasanayan pinakamataas na halaga nakatutok sa tatlong uri ng mga aglutinogen ng dugo. Ang isa sa kanila ay ang uri na responsable para sa pagpapakita ng Rh factor: kung ito ay naroroon sa erythrocyte membrane, ang pangkat ng dugo ay nasuri bilang Rh +, kung wala - Rh-. Kung ang mga erythrocytes na may Rh+ agglutinogens ay pumasok sa Rh-negative na dugo, ang katawan ay nag-trigger ng immune response at nagsisimulang gumawa ng mga antibodies sa antigen na ito, na nagiging sanhi ng mga pathological na kondisyon.

SANGGUNIAN! Ang Rh factor ay isang kumplikadong multicomponent system ng ilang dosenang antigens. Ang pinakakaraniwan sa mga ito ay agglutinogens type D (85% ng mga kaso), pati na rin ang E at C.

Ang pagsusulit sa Coombs ay isinasagawa lamang kung mayroong direktang ebidensya. Pangkalahatang listahan mga dahilan sa pagrereseta ng Coombs test:

• pagpaplano at pamamahala ng pagbubuntis (ang mga magulang ay may iba't ibang Rh);
• donasyon at paghahanda para sa pagsasalin ng dugo (blood mismatch ayon sa Rh ay hindi gaanong nakakasira kaysa mismatch ayon sa AB0 system);
• binalak operasyon(sa kaso ng muling pagdadagdag ng pagkawala ng dugo na may pagsasalin ng dugo);
• diagnosis ng mga hemolytic na sakit.

Ang mas tiyak na mga indikasyon ay nakasalalay sa uri ng pag-aaral na ginagawa.

Direktang pagsubok ng Coombs

Nakikita ng direktang pagsusuri ang mga antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ito ay kinakailangan upang masuri ang umiiral na hemolytic pathologies:

• autoimmune (mga pulang selula ng dugo at hemoglobin ay nawasak bilang resulta ng pag-atake ng sariling mga antibodies ng katawan);
• nakapagpapagaling ( proseso ng pathological nagsisimulang tumanggap ng ilan mga gamot tulad ng quinidine o procainamide);
• post-transfusion (kung ang uri ng dugo ay hindi tumutugma sa panahon ng pagsasalin ng dugo), pati na rin sa anyo ng Rh conflict sa panahon ng pagbubuntis (erythroblastosis ng mga bagong silang).

SANGGUNIAN! Ang hemolytic anemia ay isang sakit na nauugnay sa maagang pagkasira ng mga pulang selula ng dugo bilang resulta ng hemolysis, na humahantong sa hindi sapat na saturation ng oxygen ng dugo at hypoxia ng utak at/o mga panloob na organo.

Ang hemolysis ng mga elemento ng dugo ay sinusunod sa oncological, infectious, sakit sa rayuma, samakatuwid ang direktang pagsubok ng Coombs ay maaaring gamitin bilang karagdagang lunas mga diagnostic pathological kondisyon. Ito ay nagkakahalaga ng pag-alala: ang isang negatibong halaga ng pagsubok ay hindi nagbubukod ng posibilidad ng hemolysis, ngunit ito ay isang dahilan para sa karagdagang pagsusuri.

Hindi direktang pagsubok ng Coombs

Ang hindi direktang pagsusuri ay mas madalas na ginagamit upang maiwasan ang mga pathological na sitwasyon. Nakakatulong ito upang makita ang mga antibodies sa plasma ng dugo, na kinakailangan para sa pagtatasa ng pagiging tugma ng pagsasalin at pag-diagnose ng mga panganib ng Rh conflict sa panahon ng pagbubuntis.

Mahigit sa 80% ng mga tao ang may positibong Rh factor (Rh+), ayon sa pagkakabanggit, wala pang 20% ​​ay Rh negatibo. Kung ang isang Rh-ina ay bumuo ng isang Rh+ na bata, ang kanyang katawan ay nagsisimulang gumawa ng mga antibodies na umaatake sa mga red blood cell ng pangsanggol, na nagiging sanhi ng hemolysis.

Isinasaalang-alang ang katotohanan na ang porsyento ng mga kasal na "halo-halong rhesus" ay umabot sa 12-15%, ang panganib ng hemolytic disease ng mga bagong silang ay dapat na mataas, ngunit sa katotohanan lamang sa 1 sa 25 katulad na mga kaso sa mga kababaihan mayroong isang kababalaghan ng sensitization (para sa bawat 200 matagumpay na kapanganakan mayroong 1 halimbawa ng hemolytic pathology). Ito ay bahagyang dahil sa ang katunayan na ang una Rh positive na bata kadalasan ay hindi nagiging sanhi ng bukas na pagsalakay ng katawan ng ina; Ang napakalaking karamihan ng mga kaso ay nangyayari sa pangalawa at kasunod na mga bata. Ang parehong prinsipyo ay nalalapat tulad ng sa conventional sensitization sa isang partikular na allergen.

Walang reaksyon sa unang pakikipag-ugnay. Ang katawan ay nakikilala lamang sa isang bagong antigen, na gumagawa ng mga antibodies ng klase ng IgM, na responsable para sa isang mabilis na pagtugon sa immune, ngunit bihirang tumagos sa placental barrier sa dugo ng bata. Ang lahat ng mga pathological reaksyon ay nagpapakita ng kanilang sarili sa isang pangalawang "pagpupulong", kapag ang katawan ay nagsimulang gumawa ng mga antibodies ng klase ng IgG na madaling tumagos sa daloy ng dugo ng pangsanggol, na nagsisimula sa proseso ng hemolysis.

Indirect Coombs test sa panahon ng pagbubuntis nagbibigay-daan sa iyo upang makita ang pagkakaroon ng mga antibodies sa katawan ng ina at makilala sa oras paunang yugto sensitization. Ang isang positibong sagot ay nangangailangan ng pagpaparehistro na may buwanang pagsusuri ng antibody titer at mandatoryong pagpapaospital 3-4 na linggo bago ipanganak.

SANGGUNIAN! Ang hindi pagkakatugma ng Rh ay hindi nakakaapekto sa kondisyon ng ina sa anumang paraan ay bubuo lamang sa bata. SA malubhang kaso at sa kawalan ng isang napapanahong reaksyon, ang fetus ay maaaring mamatay sa sinapupunan o kaagad pagkatapos ng kapanganakan.

Paghahanda para sa pamamaraan at pagpapatupad nito

Ang venous blood ay ginagamit para sa diagnosis. Walang espesyal na pangmatagalang paghahanda ang kinakailangan para sa pagsusulit ng Coombs. Subukang sundin ang isang karaniwang hanay ng mga patakaran bago kumuha ng dugo mula sa isang ugat para sa pagsusuri:

• iwanan ang alkohol sa loob ng 3 araw, mga gamot(kung maaari);
• Planuhin ang iyong huling pagkain pagkalipas ng 8 oras bago kumuha ng dugo para sa pagsusuri;
• sa loob ng 1 oras, itigil ang paninigarilyo, pisikal, mental at emosyonal na stress;
• Bago ang pamamaraan, uminom ng isang baso ng malinis na tubig.

Ang pamamaraan ng pananaliksik ay batay sa reaksyon ng hemagglutination.

Kapag nagsasagawa ng direktang pagsubok ang isang sample ng dugo ay nakalantad sa pre-prepared antiglobulin serum na may mga kilalang indicator, ang timpla ay pinananatili ng ilang panahon at sinusuri kung may mga agglutinate, na nabuo kapag ang mga antibodies ay naroroon sa mga pulang selula ng dugo. Ang antas ng agglutinates ay nasuri gamit ang agglutinating titer.

Hindi direktang sample Ang Coombs ay may katulad na pamamaraan, ngunit isang mas kumplikadong pagkakasunud-sunod ng mga aksyon. Ang mga antigenic erythrocytes (na may Rh factor) ay ipinakilala sa pinaghiwalay na serum ng dugo, at pagkatapos lamang ng mga manipulasyong ito ay idinagdag ang antiglobulin serum para sa diagnosis at agglutinate titer.

Mga resulta ng pananaliksik

Karaniwan parehong tuwid at hindi direktang pagsubok ng Coombs dapat magbigay ng negatibong resulta:

• Ang isang negatibong direktang pagsusuri ay nagpapahiwatig na ang mga partikular na antibodies sa Rh factor na nauugnay sa mga pulang selula ng dugo ay wala sa dugo at hindi maaaring maging sanhi ng hemolysis
• ang isang negatibong hindi direktang pagsusuri ay nagpapakita na wala ring libreng antibodies sa Rh factor sa plasma ng dugo; ang katotohanang ito ay nagpapahiwatig ng pagiging tugma ng dugo ng donor sa dugo ng tatanggap (o dugo ng ina at anak) ayon sa Rh factor.

Ang isang positibong pagsusuri sa Coombs ay nagpapahiwatig ng katotohanan ng Rh sensitization ng katawan, na pangunahing dahilan Rh conflict sa kaso ng pagsasalin ng dugo o kapag nagdadala ng isang bata na may ibang Rh status. Sa kasong ito, ang mga resulta ay nananatiling hindi nagbabago sa loob ng 3 buwan (ang habang-buhay ng mga pulang selula ng dugo). Kung ang sanhi ay autoimmune hemolytic anemia, kung gayon ang isang positibong pagsusuri ay maaaring sundin ang pasyente sa loob ng ilang taon (sa ilang mga kaso, sa buong buhay niya).

SANGGUNIAN! Ang pagsusuri sa antiglobulin ay lubos na sensitibo, ngunit may kaunting nilalaman ng impormasyon. Hindi nito naitala ang aktibidad ng proseso ng hemolytic, hindi tinutukoy ang uri ng antibody at hindi matukoy ang sanhi ng patolohiya. Upang makakuha ng mas kumpletong larawan, dapat magreseta ang dumadating na manggagamot karagdagang pananaliksik(mikroskopyo ng dugo, pangkalahatan at pagsusuri ng biochemical, rheumatic test, ESR, iron at ferritin na antas).

Ang antas ng sensitization ay maaaring ipahayag nang husay (mula sa "+" hanggang "++++") o sa dami sa anyo ng isang titer:

• 1:2 - mababang halaga, ay hindi nagdudulot ng panganib;
• 1:4 - 1:8 - simula ng pag-unlad immunological reaksyon; ay hindi nagdudulot ng panganib, ngunit nangangailangan ng patuloy na pagsubaybay;
• 1:16 -1:1024 - isang malakas na anyo ng sensitization, ang agarang aksyon ay dapat gawin.

Ang dahilan para sa isang positibong pagsusuri ay maaaring:

• pagsasalin ng dugong hindi na-type (o may error sa pag-type), kapag hindi magkatugma ang Rh factor ng donor at recipient;
• Rh conflict sa panahon ng pagbubuntis (kung ang komposisyon ng mga antigens ng dugo sa ama at ina ay hindi tumutugma);
• autoimmune hemolytic anemia - parehong congenital (pangunahin) at pangalawa, na bunga ng ilang mga sakit (Evans syndrome, infectious pneumonia, syphilis, cold hemoglobinuria, lymphoma);
• hemolytic reaksyon ng gamot.

Wala sa mga problema sa itaas ang malulutas ng pasyente nang wala pangangalagang medikal. Sa lahat ng kaso, kinakailangan ang agarang konsultasyon, pagpaparehistro o emergency na ospital.

PANSIN! SA sa mga bihirang kaso posible ang maling positibong pagsusuri sa Coombs. Ang dahilan nito ay maaaring madalas na pagsasalin ng dugo, pati na rin ang isang bilang ng mga sakit: rheumatoid arthritis, lupus erythematosus, sarcoidosis. Ang hindi pangkaraniwang bagay na ito ay maaari ding maobserbahan pagkatapos ng pag-alis ng pali, pati na rin kapag ang reaksyon ay nagambala (madalas na pag-alog ng mga nilalaman, ang pagkakaroon ng mga kontaminant).

– isang antiglobulin test na naglalayong tukuyin sa Rh-negative na dugo ang hindi kumpletong anti-erythrocyte antibodies sa Rh factor - isang partikular na protina na matatagpuan sa ibabaw ng erythrocytes ng Rh-positive na dugo. Mayroong dalawang uri ng pagsusulit na ito: direktang - pagtuklas ng mga antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, hindi direktang - pagtuklas ng mga antibodies sa serum ng dugo. Ang direktang pagsusuri ay isinasagawa sa pagsusuri at pagsubaybay sa paggamot ng mga sakit sa dugo: hemolytic anemia, hemolytic disease ng mga bagong silang at iba pa. Ang isang hindi direktang pagsusuri ay isinasagawa upang masuri ang pagiging tugma ng dugo ng donor at tatanggap sa panahon ng pagsasalin, pati na rin upang matukoy ang pagkakaroon at panganib ng Rh conflict kapag nagpaplano at namamahala sa pagbubuntis. Ang materyal para sa pagsusuri ng Coombs ay venous blood; Karaniwan, ang parehong mga pagsusuri ay nagbibigay ng negatibong resulta. Ang pagsusuri ay nakumpleto sa loob ng isang araw.

Ang Coombs test ay isang klinikal na pagsusuri ng Rh-negative na dugo na naglalayong tuklasin ang mga antibodies sa Rh factor. Ang pagsusulit ay ginagamit upang matukoy ang panganib na magkaroon ng Rh conflict at hemolytic reactions. Sa bawat tao, ang ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ay naglalaman ng isang tiyak na hanay ng mga antigens o agglutinogens - mga compound ng iba't ibang kalikasan, ang presensya o kawalan nito ay ginagamit upang matukoy ang uri ng dugo at Rh factor. Mayroong maraming mga uri ng antigens; sa medikal na kasanayan, ang mga agglutinogens A at B, na tumutukoy sa pangkat ng dugo, at ang agglutinogen D, ang Rh factor, ay ang pinakamahalagang praktikal na kahalagahan. Sa isang positibong Rh factor, ang mga D antigens ay nakikita sa panlabas na lamad ng mga erythrocytes, ngunit sa isang negatibong kadahilanan, sila ay hindi.

Ang Coombs test, na tinatawag ding antiglobulin test, ay naglalayong makita ang hindi kumpletong anti-erythrocyte antibodies sa Rh factor system sa dugo. Ang mga antibodies sa Rh factor ay mga partikular na immunoglobulin na nagagawa sa Rh-negative na dugo kapag ang mga pulang selula ng dugo na may mga aglutinogen D ay pumasok dito. Ito ay maaaring mangyari kapag ang dugo ng isang fetus at isang buntis na babae ay pinaghalo, sa panahon ng pagsasalin ng dugo nang walang paunang dugo pagta-type. Ang pagsubok ng Coombs ay umiiral sa dalawang bersyon - direkta at hindi direkta. Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ay nakita. Ang pag-aaral ay ginagamit upang matukoy ang sanhi ng hemolytic reaction. Ang indirect Coombs test ay naglalayong makita ang mga anti-erythrocyte antibodies sa plasma ng dugo. Ito ay kinakailangan upang matukoy ang pagiging tugma ng dugo sa pagitan ng donor at tatanggap o ina at fetus, at tumutulong na maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict at kasunod na hemolysis ng mga pulang selula ng dugo.

Ang dugo para sa parehong bersyon ng Coombs test ay kinuha mula sa isang ugat. Ang pagsusuri ay isinasagawa sa pamamagitan ng agglutination gamit ang antiglobulin serum. Ang mga resulta ng pag-aaral ay ginagamit sa hematology upang matukoy ang mga sanhi ng hemolytic reaksyon, sa operasyon at resuscitation kapag nagsasagawa ng pagsasalin ng dugo, sa obstetrics at ginekolohiya kapag sinusubaybayan ang pagbubuntis sa mga babaeng may Rh-negative na dugo.

Mga indikasyon

Ang direktang pagsusuri ng Coombs, na nakakakita ng mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, ay inireseta para sa mga reaksiyong hemolytic (pagkasira ng mga pulang selula ng dugo) ng iba't ibang pinagmulan. Ang pag-aaral ay ipinahiwatig para sa pangunahing autoimmune hemolytic anemia, post-transfusion hemolytic anemia, hemolytic disease ng bagong panganak, hemolysis ng mga pulang selula ng dugo na sanhi ng autoimmune, tumor o mga nakakahawang sakit, pati na rin ang pag-inom ng mga gamot, halimbawa, quinidine, methyldopa, procainamide . Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs, na tumutukoy sa mga antibodies sa plasma ng dugo, ay ginagamit upang maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict. Ito ay ipinahiwatig para sa mga pasyente bilang paghahanda para sa pagsasalin ng dugo, pati na rin para sa mga buntis na kababaihan na may negatibong Rh factor, sa kondisyon na ang hinaharap na ama ng bata ay may positibong Rh factor.

Upang matukoy ang Rh compatibility, ang Coombs test ay hindi inireseta sa mga pasyenteng may Rh-positive na dugo. Sa mga kasong ito, mayroon nang mga antigen sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ang paggawa ng mga antibodies ay hindi maaaring pukawin ng pagsasalin ng dugo o pagpasok ng dugo ng pangsanggol sa daluyan ng dugo ng buntis. Gayundin, ang pag-aaral ay hindi ipinahiwatig para sa mga buntis na kababaihan kung ang parehong mga magulang ay may negatibong Rh factor - isang minanang recessive na katangian. Ang bata sa gayong mga mag-asawa ay laging may Rh-negative na dugo ay imposible ang isang immunological conflict sa ina. Sa hemolytic pathologies, ang antiglobulin test ay hindi ginagamit upang subaybayan ang tagumpay ng therapy, dahil ang mga resulta ay hindi sumasalamin sa aktibidad ng proseso ng pagkasira ng mga pulang selula ng dugo.

Ang isang limitasyon ng pagsubok ng Coombs ay ang pagiging matrabaho ng pamamaraan ng pananaliksik - upang makakuha ng maaasahang mga resulta, kinakailangan na sumunod sa mga kondisyon ng temperatura at oras, mga patakaran para sa paghahanda ng mga reagents at biomaterial. Kasama sa mga bentahe ng Coombs test ang mataas na sensitivity nito. Sa hemolytic anemia, ang mga resulta ng pagsusulit na ito ay nananatiling positibo, kahit na ang mga antas ng hemoglobin, bilirubin at reticulocyte ay normal.

Paghahanda para sa pagsusuri at pagkolekta ng materyal

Ang materyal na ginamit sa pagsasagawa ng Coombs test ay venous blood. Walang mga espesyal na kinakailangan para sa oras ng pamamaraan ng sampling ng dugo at para sa paghahanda ng pasyente. Tulad ng anumang pag-aaral, inirerekumenda na magpahinga pagkatapos kumain ng hindi bababa sa 4 na oras, at sa huling 30 minuto, ihinto ang paninigarilyo, ehersisyo, at iwasan ang emosyonal na stress. Dapat ding talakayin nang maaga sa iyong doktor ang pangangailangang huminto sa pag-inom ng mga gamot - maaaring sirain ng ilang gamot ang mga resulta ng pagsusuri sa Coombs. Kinukuha ang dugo gamit ang isang syringe mula sa cubital vein, o mas madalas mula sa isang ugat sa likod ng kamay. Sa loob ng ilang oras, ang materyal ay naihatid sa laboratoryo.

Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang antiglobulin serum ay idinaragdag sa serum ng dugo ng pasyente. Pagkaraan ng ilang oras, ang halo ay sinusuri para sa pagkakaroon ng mga agglutinates - sila ay nabuo kung mayroong mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo. Kung positibo ang resulta, tinutukoy ang agglutinating titer. Ang indirect Coombs test ay binubuo ng higit pang mga hakbang. Una, ang mga antibodies na naroroon sa serum ay naayos sa mga iniksyon na pulang selula ng dugo sa panahon ng pagpapapisa ng itlog. Pagkatapos ang antiglobulin serum ay idinagdag sa sample, pagkatapos ng ilang oras ang presensya at titer ng mga agglutinates ay natutukoy. Ang panahon ng pagsusuri ay 1 araw.

Mga normal na resulta

Karaniwan, ang resulta ng direktang pagsusuri sa Coombs ay negatibo (-). Nangangahulugan ito na walang mga antibodies na nauugnay sa mga pulang selula ng dugo sa dugo, at hindi sila maaaring maging sanhi ng hemolysis. Ang normal na resulta ng hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay negatibo din (-), ibig sabihin, walang mga antibodies sa Rh factor sa plasma ng dugo. Kapag naghahanda para sa pagsasalin ng dugo para sa tatanggap, nangangahulugan ito ng pagiging tugma sa dugo ng donor kapag sinusubaybayan ang pagbubuntis, nangangahulugan ito ng kawalan ng Rh sensitization ng ina, isang mababang panganib na magkaroon ng isang immunological conflict. Ang mga pisyolohikal na kadahilanan, tulad ng diyeta o pisikal na aktibidad, ay hindi makakaapekto sa resulta ng pagsusulit. Samakatuwid, kung positibo ang resulta, kinakailangan ang konsultasyon ng doktor.

Diagnostic na halaga ng pagsusuri

Ang isang positibong resulta ng pagsusulit sa Coombs ay ipinahayag nang husay, mula sa (+) hanggang (++++), o sa dami, ng mga titer mula 1:16 hanggang 1:256. Ang pagtukoy ng konsentrasyon ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo at sa serum ng dugo ay isinasagawa sa parehong uri ng mga sample. Kung positibo ang direktang pagsusuri ng Coombs, ang mga antibodies ay makikita sa panlabas na lamad ng mga pulang selula ng dugo, na humahantong sa pagkasira ng mga selula ng dugo na ito. Ang sanhi ay maaaring pagsasalin ng dugo nang walang paunang pag-type - post-transfusion hemolytic reaksyon, pati na rin ang erythroblastosis ng bagong panganak, hemolytic reaksyon dahil sa paggamit ng mga gamot, pangunahin o pangalawang autoimmune hemolytic anemia. Ang pangalawang pagkasira ng mga pulang selula ng dugo ay maaaring sanhi ng systemic lupus erythematosus, Evans syndrome, Waldenström macroglobulinemia, paroxysmal cold hemoglobinuria, talamak na lymphocytic leukemia, lymphoma, infectious mononucleosis, syphilis, mycoplasma pneumonia.

Ang isang positibong resulta ng hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa Rh factor sa plasma. Sa pagsasagawa, nangangahulugan ito na ang Rh sensitization ay naganap, at may posibilidad na magkaroon ng Rh conflict pagkatapos ng pagbubuhos ng donor blood sa panahon ng pagbubuntis. Upang maiwasan ang mga komplikasyon sa pagbubuntis, ang mga babaeng may positibong resulta ng pagsusuri sa Coombs ay inilalagay sa isang espesyal na rehistro.

Paggamot ng mga abnormalidad

Ang Coombs test ay tumutukoy sa isoserological studies. Ang mga resulta nito ay ginagawang posible upang makilala ang isang hemolytic reaksyon, pati na rin matukoy ang pagiging tugma ng dugo ng donor at tatanggap, ina at fetus, upang maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict. Kung positibo ang resulta ng pagsusuri, kailangan mong humingi ng payo mula sa iyong dumadating na manggagamot - obstetrician-gynecologist, hematologist, surgeon.