Maglagay ng 1 malaking patak ng serum O(I), A(II), B(III) sa isang plato o glass slide gamit ang mga pipette (iba!). Pagkatapos tandaan ang oras, gumamit ng isang malinis na basong baras o isang malinis na sulok ng isang glass slide upang pagsamahin ang mga patak ng serum sa mga patak ng dugo. Ang pagpapasiya ay tumatagal ng 5 minuto, nanginginig ang plato, pagkatapos ay magdagdag ng 1 patak ng solusyon sa asin sa bawat halo ng mga patak at suriin ang mga resulta. Mas maganda kung ang serum ay dumating sa 2 magkaibang serye. Ang mga resulta ng pangkat ng dugo ay dapat tumugma sa parehong serum lot.

Pagsusuri ng mga resulta ng isohemagglutination:

isohemagglutination.

Kung positibo ang reaksyon, lumilitaw ang maliliit na pulang butil ng malagkit na pulang selula ng dugo sa pinaghalong. Ang mga butil ay nagsasama sa mas malalaking butil, at ang huli sa mga natuklap. Ang suwero ay halos kupas; kung ang reaksyon ay negatibo, ang timpla ay nananatiling pantay na kulay sa loob ng 5 minuto at walang mga butil na natagpuan;

Kapag nagtatrabaho sa 3 sera ng mga pangkat O(I), A(II), B(III), 4 na kumbinasyon ng mga reaksyon ang posible:

1. kung ang lahat ng 3 sera ay nagbigay ng negatibong reaksyon, ibig sabihin, ang timpla ay pantay na kulay rosas - ito ay O(I) na uri ng dugo;

   kung ang serum lamang ng pangkat A(II) ay nagbigay ng negatibong reaksyon, at ang sera O(I) at B(III) ay nagbigay ng positibong reaksyon, iyon ay, lumitaw ang mga butil - ito ay A(II) na pangkat ng dugo;

   Ang serum ng pangkat B(II) ay nagbigay ng negatibong reaksyon, at ang sera ng pangkat O(I) at A(II) ay nagbigay ng positibong reaksyon - ito ay B(III) na pangkat ng dugo.

lahat ng 3 sera ay nagbigay ng mga positibong reaksyon - ang nasuri na dugo ay pangkat AB(IV). Sa kasong ito, ang isang pag-aaral ay isinasagawa gamit ang AB(IV) group serum.

pansinin mo! Ang mga patak ng dugo na sinusuri ay dapat na 5-10 beses na mas maliit kaysa sa mga patak ng serum.

Mga error sa isohemagglutination.

Pagkabigong magsagawa ng agglutination kung saan ito dapat at pagkakaroon ng agglutination kung saan hindi dapat. Maaaring dahil ito sa mahinang titer ng serum at mahinang pagsasama-sama ng red blood cell.

Pagkakaroon ng agglutination kung saan hindi dapat magkaroon- Ito ay pseudoagglutination, kapag ang mga tambak ng pulang selula ng dugo ay bumubuo ng "mga haligi ng barya". Ang pag-alog ng plato o pagdaragdag ng asin ay sumisira sa kanila.

Panagglutination, kapag pinagdikit-dikit ng serum ang lahat ng pulang selula ng dugo, kabilang ang mga may sariling uri ng dugo. Sa ika-5 minuto, nawawala ang mga palatandaan ng aglutinasyon.

Mayroon ding tinatawag na cold panagglutination, kapag ang mga pulang selula ng dugo ay magkakadikit dahil sa mababang temperatura ng hangin (sa ibaba 15 ° C) sa silid.

Sa lahat ng mga kasong ito, maaaring ang isang paulit-ulit na reaksyon ay isinasagawa, o gumagamit ng karaniwang mga pulang selula ng dugo.

Pagpapasiya ng Rh dugo

Upang matukoy ang katayuan ng Rh, ibig sabihin, upang makita ang pagkakaroon o kawalan ng mga antigen ng Rh system sa dugo ng mga tao, ginagamit ang karaniwang anti-Rh sera (reagents), na nag-iiba sa pagtitiyak, ibig sabihin, naglalaman ng mga antibodies sa iba't ibang antigen ng sistemang ito. Upang matukoy ang Rh 0 (D) antigen, ang anti-Rhesus serum ay kadalasang ginagamit sa pagdaragdag ng isang 10% gelatin solution, o isang karaniwang anti-Rhesus reagent na inihanda nang maaga na may 33% polyglucin solution ay ginagamit. Upang makakuha ng mas tumpak na mga resulta ng pananaliksik, pati na rin upang matukoy ang mga antigen ng iba pang mga serological system, ang Coombs test ay ginagamit (ito rin ay napakasensitibo sa pagtukoy ng compatibility ng transfused blood). Para sa pananaliksik, ang katutubong dugo o dugo na inihanda na may ilang pang-imbak ay ginagamit. Sa kasong ito, ang dugo ay dapat hugasan mula sa pang-imbak na may sampung beses na dami ng isotonic sodium chloride solution. Kapag tinutukoy ang katayuan ng Rh- Rh 0 (D) dalawang sample ng serum o anti-Rhesus reagent ng dalawang magkaibang serye ang dapat gamitin at sa parehong oras ay karaniwang pulang selula ng dugo na nakuha mula sa dugo mula sa Rh-positive (Rh +) at Rh-negative (Rh -) ang mga indibidwal ay dapat gamitin para sa kontrol. Kapag tinutukoy ang iba pang isoantigens, kontrolin ang mga pulang selula ng dugo na naglalaman o kulang sa antigen kung saan ang mga antibodies sa karaniwang serum ay dapat gamitin nang naaayon.

Ang mga partial heat agglutinin ay ang pinakakaraniwang uri ng antibodies na maaaring maging sanhi ng pagbuo ng autoimmune hemolytic anemia. Ang mga antibodies na ito ay nabibilang sa IgG, bihira sa IgM, IgA.

COOMBS TEST

Pagsubok sa Coombs: panimula. Ang Coombs test ay isang laboratory diagnostic method batay sa hemagglutination reaction.

Ang pangunahing paraan para sa pag-diagnose ng autoimmune hemolytic anemia ay ang Coombs test. Nakabatay ito sa kakayahan ng mga antibodies na tiyak sa mga immunoglobulin (lalo na sa IgG) o mga bahagi ng pandagdag (lalo na sa S3) upang pagsama-samahin ang mga erythrocyte na pinahiran ng IgG o S3.

Ang pagbubuklod ng IgG at C3b sa mga erythrocytes ay sinusunod sa mga sakit na autoimmune. hemolytic anemia at immune hemolytic anemia na dulot ng droga. Direktang pagsubok ng Coombs. Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit upang tuklasin ang mga antibodies o mga bahaging pandagdag na naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ito ay isinasagawa bilang mga sumusunod:

Upang makakuha ng mga antibodies sa mga immunoglobulin ng tao (antiglobulin serum) o pandagdag (anticomplementary serum), ang hayop ay nabakunahan ng human serum, immunoglobulin o pandagdag ng tao. Ang serum na nakuha mula sa hayop ay dinadalisay mula sa mga antibodies sa iba pang mga protina.

Ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ay hinuhugasan ng asin upang ganap na maalis ang serum, na neutralisahin ang mga antibodies sa mga immunoglobulin at umakma at maaaring magdulot ng maling negatibong resulta.

Kung ang mga antibodies o mga bahagi ng pandagdag ay naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, ang pagdaragdag ng antiglobulin o anti-complement na serum ay nagdudulot ng pagsasama-sama ng mga pulang selula ng dugo.

Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:

Autoimmune hemolysis.

Hemolytic disease ng mga bagong silang.

Ang immune hemolytic anemia na dulot ng droga.

Mga reaksyon ng hemolytic transfusion. Hindi direktang pagsubok ng Coombs. Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay nakakakita ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo sa serum. Upang gawin ito, ang suwero ng pasyente ay inilublob sa pangkat 0 na donor na mga pulang selula ng dugo, at pagkatapos ay isinasagawa ang isang direktang pagsusuri sa Coombs.

Ang indirect Coombs test ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:

Pagpapasiya ng indibidwal na pagkakatugma ng dugo ng donor at tatanggap.

Pagtuklas ng mga alloantibodies, kabilang ang mga antibodies na nagdudulot ng mga reaksyon ng hemolytic transfusion.

Pagpapasiya ng surface erythrocyte antigens sa medikal na genetika at forensic na gamot.

Pagkumpirma ng identical twins sa panahon ng bone marrow transplantation.

Upang magsagawa ng biological test, ang dugo ay magsisimulang maisalin sa lalong madaling panahon (mas mabuti sa isang stream). Pagkatapos ng pagsasalin ng 25 ML ng dugo, ang tubo ng system ay naka-clamp ng isang clamp. Pagkatapos ay mayroong isang pause sa loob ng 3 minuto, kung saan ang kondisyon ng tatanggap ay sinusubaybayan. Upang magsagawa ng biological test, 25 ML ng dugo ay iniksyon ng tatlong beses. Sa pagtatapos ng pagsubok (pagkatapos ng pagsasalin ng unang 75 ml ng dugo sa mga fractional na dosis ng 25 ml sa pagitan ng 3 minuto), ang sistema ay nababagay sa kinakailangang bilis pagsasalin ng dugo. Kapag nagsalin ng higit sa isang bote ng dugo sa isang pasyente, kinakailangang alisin ang karayom ​​mula sa ugat. Sa kasong ito, ang karayom ​​ay tinanggal mula sa test tube ng vial kung saan ang dugo ay naubos at ipinasok sa susunod na vial. Ang tubo ng system (goma o plastik) ay naka-clamp sa sandaling ito gamit ang isang clamp. Kung sa panahon ng pagsasalin ng dugo ay kinakailangan na magbigay ng anumang iba pang gamot sa intravenously sa tatanggap, ito ay ginagawa sa pamamagitan ng pagtusok sa rubber tube ng system. Ang mga punctures ng plastic tube ay hindi katanggap-tanggap, dahil hindi sila nahuhulog. Pagkatapos ng bawat pagsasalin ng dugo, ang pasyente ay dapat na subaybayan upang makilala at maalis kaagad posibleng komplikasyon, kasama ang mga reaksiyong alerdyi. 2 oras pagkatapos ng pagtatapos ng pagsasalin ng dugo, ang temperatura ng katawan ay dapat masukat. Kung ito ay tumaas, ang pagsukat ay dapat na ulitin bawat oras para sa susunod na 4 na oras. Ang parehong mahalaga ay ang pagsubaybay sa pag-ihi at komposisyon ng ihi, na ginagawang posible upang maitaguyod ang pagkakaroon ng isang nakakalason na reaksyon pagkatapos ng pagsasalin. Ang simula ng oliguria at anuria pagkatapos ng pagsasalin ng dugo, ang pagkakaroon ng mga selula ng dugo at protina sa ihi ay isang direktang indikasyon ng pag-unlad ng post-transfusion hemolysis.

Naaprubahan sa pamamagitan ng pagkakasunud-sunod ng Roszdravnadzor

sa paggamit ng "Set of reagents para sa pagtukoy ng mga antigen at antibodies ng Rhesus system sa dugo ng tao"
(AGS para sa pagsusulit ng Coombs)

TU 9398-102-51203590-2012

RU No. RZN 2013/1255 na may petsang 10/11/2013

I. PANIMULA

Ang karaniwang serum para sa pagsusulit ng Coombs ay naglalaman ng mga partikular na heteroimmune antibodies laban sa mga protina ng dugo ng tao at nilayon para gamitin sa dalawang opsyon sa reaksyon - direkta at hindi direktang pagsusuri ng Coombs.

Direktang pagsubok ng Coombs ginagamit upang matukoy ang erythrocyte sensitization sa vivo habang sakit na hemolytic mga bagong silang at sa mga pasyente na may autoimmune na anyo ng talamak na hemolytic anemia, pati na rin ang ilang iba pang mga kondisyon. Nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs Binubuo ang katotohanan na ang suwero para sa pagsusuri ng Coombs ay idinagdag sa mga pulang selula ng dugo sa ilalim ng pag-aaral, na dating hugasan mula sa mga protina ng kanilang sariling plasma. Kung ang mga pulang selula ng dugo ay na-sensitize sa vivo, ang reaksyon ay nagreresulta sa kanilang aglutinasyon.

Hindi direktang pagsubok ng Coombs ginamit bilang isang pagsubok upang matukoy ang estado ng sensitization ng katawan, na nagpapahintulot sa pagtuklas ng mga antibodies na nasa isang libreng estado sa serum ng dugo ng taong sinusuri; bilang isang pagsubok para sa pagiging tugma ng nasalin na dugo, kapag pinag-aralan ang epekto ng serum ng tatanggap sa mga pulang selula ng dugo ng nilalayong donor; at bilang isang pagsubok para sa pagtukoy ng iba't ibang grupong antigens sa mga erythrocytes gamit ang paunang pagkakalantad sa karaniwang sera na naglalaman ng mga antibodies na alam ang pagiging tiyak. Indirect Coombs test (lahat ng opsyon) ginawa sa dalawang yugto, ang una ay ang incubation ng test (o standard) serum na may standard (o test) erythrocytes, i.e. sensitization ng erythrocytes in vitro. Ang ikalawang yugto ay ang aktwal na reaksyon sa serum para sa Coombs test, na ginagawa sa parehong paraan tulad ng direktang Coombs test.

Ang huling resulta ng reaksyon sa parehong direkta at hindi direktang mga pagsubok sa Coombs ay nangyayari dahil sa pakikipag-ugnayan karaniwang serum para sa pagsusuri ng Coombs, na may mga antibodies (protein ng dugo ng tao) na naayos sa mga pulang selula ng dugo. Ang resulta na ito ay nagpapakita ng sarili bilang aglutinasyon ng mga pulang selula ng dugo. Upang obserbahan ang agglutination, dapat kang gumamit ng isang puting porselana o anumang puting plato na may nababasang ibabaw upang ang mga patak na inilapat dito ay mahusay na pinaghalo at hindi kumalat sa ibabaw ng plato. Ang mga halo-halong patak ay dapat na bahagyang ikalat sa ibabaw ng plato, humigit-kumulang sa laki ng isang 2-kopeck na barya.
II. PAGHAHANDA NG REACTION INGREDIENTS

Ang test serum upang matukoy ang presensya at pagtitiyak ng mga antibodies sa loob nito ay nakukuha mula sa dugo ng taong sinusuri nang walang pagdaragdag ng preservative. Mag-imbak sa temperatura na + 4–8 0 C nang hindi hihigit sa 2 araw o nagyelo sa loob ng 1 buwan.

Ang serum para sa pagsubok sa pagiging tugma ay nakuha sa parehong paraan, ngunit ginagamit sa istante ng buhay na hindi hihigit sa 2 araw.

Ang mga pulang selula ng dugo na inilaan para sa pagtukoy ng ilang mga isoantigens sa kanila ay inihanda na may ilang uri ng pang-imbak mula sa taong sinusuri ang dugo. Maaari mo ring gamitin ang red blood cell sediment mula sa dugong kinuha nang walang preservative.

Kapag sinusuri ang pagiging tugma, ang donor na dugo ay ginagamit, na inilabas sa pamamagitan ng isang karayom ​​mula sa isang vial na inihanda para sa pagsasalin ng dugo.

Sa lahat ng kaso, ang mga pulang selula ng dugo ay hinuhugasan ng 3-4 na beses sa mga test tube mula sa plasma sa pamamagitan ng pagdaragdag ng 8-10 volume ng isotonic sodium chloride solution sa isang volume ng red blood cell, na sinusundan ng paghahalo at centrifugation sa 1500-2000 rpm para sa 5- 10 minuto (hanggang sa kumpletong erythrocyte sedimentation). Pagkatapos ng bawat centrifugation, sinisipsip ang supernatant.
III. MGA TEKNIK NG REAKSIYON

Ang mga test erythrocytes ay inihanda sa anyo ng isang 5% na suspensyon, kung saan ang isang patak ng erythrocytes na hugasan ng apat na beses ay halo-halong sa isang test tube na may 19 na patak ng isotonic sodium chloride solution.

Ang isang patak (0.05 ml) ng 5% na suspensyon ng mga pulang selula ng dugo ay inililipat sa isang puting plato at pinahiran. Ang plato ay inuuga at inoobserbahan sa loob ng 3 minuto upang makita kung naganap ang agglutination ng mga pulang selula ng dugo. Kung hindi nangyari ang agglutination, pagkatapos ay magdagdag ng 1-2 patak ng karaniwang serum para sa pagsubok ng Coombs, paghaluin ang mga patak nang lubusan, pagkatapos ay bahagyang iling ang plato, pagkatapos ay iwanan ito nang mag-isa para sa isa o dalawang minuto at iling muli. Kasabay nito, ang resulta ay sinusubaybayan sa loob ng 10 minuto, na ipinahayag sa pagkakaroon o kawalan ng agglutination.
Interpretasyon ng mga resulta ng direktang pagsusulit ng Coombs.

Walang agglutination - negatibong pagsubok

Pagkakaroon ng agglutination – isang positibong pagsusuri, na nagpapahiwatig ng sensitization ng mga pulang selula ng dugo na sinusuri, ibig sabihin, ang pagsipsip ng mga antibodies sa kanila, na naganap sa vivo sa katawan ng tao (bagong panganak, pasyente). Kung agglutination ng nasubok na mga pulang selula ng dugo nangyari bago idagdag serum para sa pagsubok ng Coombs; ang resulta ng direktang pagsusuri ay hindi isinasaalang-alang.
2. Hindi direktang pagsubok ng Coombs

Inilaan para sa pagtuklas ng mga isoantibodies sa serum ng dugo ng taong sinuri

Ito ay ginagamit sa mga kaso kung saan ito ay kinakailangan upang malaman kung ang dugo ng isang pasyente, buntis na babae, donor, atbp ay naglalaman ng isoimmune antibodies ng hindi kumpletong anyo at upang maitaguyod ang kanilang pagtitiyak. Para sa reaksyon, ginagamit ang serum ng dugo ng taong sinusuri at karaniwang mga pulang selula ng dugo na alam ang pagiging tiyak. Kabilang sa 8-10 o higit pang mga sample ng red blood cell na ito ay dapat mayroong mga pagkakaiba sa mga kadahilanan mula sa iba pang mga system at napakahalaga na ang bawat isa sa mga salik na ito ay nakapaloob sa hindi bababa sa isang sample ng pulang selula ng dugo. Kasama rin sa panel ang mga sample ng Rh-negative erythrocytes na may iba't ibang mga kumbinasyon ng mga antigens ng iba pang mga system, upang kabilang sa mga ito ay mayroong Duffy-positive at Duffy-negative, na, naman, ay nahahati sa Kell-positive at Kell-negative, Kidd-positive at Kidd-negative, atbp. Bilang negatibong kontrol, kung maaari, ang mga erythrocytes ng taong sinusuri ang serum ay kasama sa reaksyon.

Teknik ng reaksyon

Ang isang bilang ng mga centrifuge o iba pang mga tubo na may dami ng 3-10 ml ay naka-install sa isang stand, ayon sa bilang ng mga sample ng erythrocyte na kasama sa reaksyon. Ang mga tubo ay may label at, ayon sa label, 1 maliit na patak (0.01 ml) ng hugasan na karaniwang mga pulang selula ng dugo ay idinagdag sa kanila. Tatlong patak ng test serum ang ibinabagsak sa bawat test tube, ang mga test tube ay inalog nang malakas upang paghaluin ang mga pulang selula ng dugo sa serum at inilagay sa thermostat sa 37 0 C sa loob ng 45 minuto. Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog, ang mga tubo ay aalisin mula sa termostat, at ang mga pulang selula ng dugo ay hugasan sa pamamagitan ng pagdaragdag ng isotonic sodium chloride solution sa tuktok ng tubo, paghahalo at kasunod na sentripugasyon. Ang paghuhugas ay paulit-ulit ng 3-4 na beses, sa bawat oras na maingat na sinipsip ang supernatant, pagkatapos ay 2 patak ng isotonic sodium chloride solution ay idinagdag sa hugasan na mga pulang selula ng dugo upang makakuha ng humigit-kumulang 5% ng suspensyon (kapag gumagamit ng mga centrifuge tubes, maaari mong limitahan ang iyong sarili sa paghuhugas ng dalawang beses).

Ang 1 patak ng 5% na suspensyon ng erythrocytes mula sa bawat test tube ay inililipat sa isang puting plato, 1-2 patak ng karaniwang serum para sa pagsubok ng Coombs ay idinagdag doon at ang serum ay lubusang hinaluan ng mga erythrocytes. Ang plato ay bahagyang inalog, pagkatapos ay iwanan nang mag-isa sa loob ng 1-2 minuto at pana-panahong inalog muli, habang sabay na sinusunod ang resulta ng reaksyon sa loob ng 20 minuto.

Interpretasyon ng mga resulta

Walang mga palatandaan ng agglutination (negatibong resulta) sa lahat ng sample ay nangangahulugan na ang test serum ay hindi naglalaman ng mga hindi kumpletong antibodies sa grupong antigens na nakapaloob sa karaniwang mga pulang selula ng dugo na kasama sa pag-aaral.

Kung sa ilan o karamihan sa mga patak, bilang karagdagan sa kontrol, sinusunod aglutinasyon , nangangahulugan ito na ang test serum ay naglalaman ng hindi kumpletong antibodies laban sa erythrocyte antigens. Ang tanong ng pagiging tiyak ng mga antibodies na ito ay napagpasyahan sa pamamagitan ng paghahambing ng positibo at mga negatibong reaksyon na may antigenic na istraktura ng mga pulang selula ng dugo na kasama sa reaksyon. Ang tanong ng aktibidad ng mga antibodies na ito ay nalutas sa pamamagitan ng titration.

Halimbawa 1. Naganap ang aglutination kasama ang lahat ng mga sample ng erythrocytes na naglalaman ng Rh 0 (D) factor, anuman ang presensya o kawalan ng iba pang mga kadahilanan ng system na ito at iba pang mga system, habang sa lahat ng Rh 0 (D) - mga negatibong sample, ang agglutination ay hindi naobserbahan (kaya anuman ang pagkakaroon o kawalan ng iba pang mga kadahilanan) - nangangahulugan ito na ang test serum ay naglalaman ng hindi kumpletong anti-Rhesus antibodies - Rh 0 (D).

Halimbawa 2. Naganap ang aglutination kasama ang lahat ng mga sample ng erythrocytes na naglalaman ng Duffy factor, anuman ang pagkakaroon o kawalan ng mga antigens ng Rhesus system at iba pang mga system, habang walang agglutination ang naobserbahan sa lahat ng Duffy-negative na sample, na nangangahulugan na ang test serum ay naglalaman ng hindi kumpletong anti- mga antibodies. -Duffy.

Dagdag. Kung ang institusyon ay walang kumpletong panel ng karaniwang mga pulang selula ng dugo, ngunit may pangangailangan na subukan ang serum para sa pagkakaroon ng mga antibodies, inirerekomenda na magsagawa ng isang pag-aaral na may 25-30 random na kinuha na mga sample ng mga pulang selula ng dugo. malusog na indibidwal pangkat 0 (I) o ang serum na may parehong pangalan bilang test serum. Gagawin nitong posible na malutas ang isyu ng pagkakaroon o kawalan ng mga antibodies sa karamihan ng mga antigen ng Rh-Hr, Duffy, Kell, Kidd system.

Pagkatanggap positibong resulta Ang karagdagang konklusyon tungkol sa pagtitiyak ng mga nakitang antibodies ay maaaring mapagpasyahan ng isang espesyal na pag-aaral na may kumpletong panel ng karaniwang mga pulang selula ng dugo.

3. Teknik para sa pagsasagawa ng indirect Coombs test bilang isang pagsubok para sa pagiging tugma ng nasalin na dugo

Upang maiwasan ang hindi pagkakatugma sa panahon ng pagsasalin ng dugo, ang mga sumusunod na pagsusuri sa pagiging tugma ay dapat gawin bago ang pagsasalin:

1. 
   Isang pagsubok sa pagiging tugma para sa mga pangkat ng dugo ng ABO, na ginagawa sa isang eroplano sa temperatura ng silid.
2. 
   Mga pagsubok sa pagiging tugma para sa Rh factor at iba pang isoantigens.

Ang hindi pagkakatugma para sa Rh factor at ilang iba pang isoantigens ay maaaring depende sa pagkakaroon ng kumpletong antibodies (natukoy sa isang saline na kapaligiran sa 37 0 C sa mga test tube) at, kadalasan, sa mga hindi kumpletong antibodies, kung saan ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay ang pinaka. sensitibo.

Ang isang maliit (0.01 ml) na patak ng hugasan na donor erythrocytes, na kinuha sa pamamagitan ng isang karayom ​​mula sa isang bote ng dugo na inilaan para sa pagsasalin, ay inilipat sa ilalim ng isang centrifuge o iba pang tubo na may dami ng 3-4 ml at 3 patak ng pasyente. Ang serum ay idinagdag dito. Ang test tube ay inalog upang paghaluin ang mga erythrocytes sa suwero, pagkatapos nito ay ilagay sa isang thermostat sa 37 0 C sa loob ng 45 minuto. Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog, isang isotonic sodium chloride solution ay idinagdag sa tuktok ng test tube, ang mga nilalaman ng test tube ay halo-halong at centrifuge sa loob ng 5-10 minuto. Ang paghuhugas na ito ng mga pulang selula ng dugo ay inuulit ng 3 beses, sa bawat oras na maingat na inaalis ang supernatant. Kapag gumagamit ng centrifuge tubes, maaari mong limitahan ang iyong sarili sa paghuhugas ng dalawang beses. Magdagdag ng 2 patak ng isotonic sodium chloride solution sa hugasan na pulang selula ng dugo upang makakuha ng humigit-kumulang 5% na suspensyon.

Ang 1 patak ng 5% na suspensyon ng mga pulang selula ng dugo ay inililipat sa isang puting plato, 1-2 patak ng karaniwang serum para sa pagsusuri ng Coombs ay idinagdag doon at ang serum ay lubusang hinaluan ng mga pulang selula ng dugo. Pagkatapos ang plato ay bahagyang inalog, naiwan nang mag-isa sa loob ng 1-2 minuto at pana-panahong inalog muli, habang sinusunod ang resulta sa loob ng 20 minuto.

Tandaan: Sa kaso ng Rh incompatibility, ang agglutination ay kadalasang nangyayari sa loob ng unang minuto, ngunit may mababang titer ng Rh antibodies (o iba pang antibodies), ang agglutination ay maaaring mangyari mamaya, minsan sa ikadalawampung minuto.
Interpretasyon ng resulta:

Nakikita ang mga aglutinate sa anyo ng mga bukol sa isang clear o ganap na bleached background - nangangahulugan ito na ang dugo ng donor hindi magkatugma kasama ang dugo ng tatanggap at hindi maisalin sa kanya.

kawalan ang mga palatandaan ng aglutinasyon ay nangangahulugan na ang dugo ng pasyente ay hindi naglalaman ng mga hindi kumpletong antibodies sa mga pulang selula ng dugo ng donor na may kaugnayan sa Rh factor at iba pang isoantigens kung saan maaaring mabuo ang mga hindi kumpletong antibodies.

Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay sensitibo lamang para sa mga hindi kumpletong antibodies.
4. Indirect Coombs test technique para sa pagtukoy ng antigenic na istraktura ng erythrocytes

Ang sample na ito ay ginagamit upang matukoy ang presensya o kawalan ng anuman grupong antigen erythrocytes gamit ang karaniwang serum na naglalaman ng kaukulang antibodies sa hindi kumpletong anyo.

Kadalasan, ang hindi direktang pagsubok ng Coombs ay ginagamit upang matukoy ang mga antigen na Kell (K), Duffy (Fy), Kidd (Jk), at upang matukoy din ang mahinang antigen ng Rh system (Du).

Bago magpatuloy sa pagtukoy ng mga antigen, ang mga pulang selula ng dugo sa ilalim ng pag-aaral ay dapat na masuri sa isang direktang pagsusuri ng Coombs. Kung ang resulta ng isang direktang pagsusuri ay positibo, ang pagpapasiya ng mga antigen sa pamamagitan ng isang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay hindi maaaring isagawa at ang iba pang mga reaksyon ay dapat gamitin para sa layuning ito.

Para sa reaksyon, ang centrifuge o iba pang mga tubo na may dami na 3-4 ml ay ginagamit sa halagang tatlo: isa para sa pagsubok na sample ng mga erythrocytes at dalawa para sa 1 maliit (0.01 ml) na patak ng tatlong beses na hugasan na mga test erythrocytes ay idinagdag sa sa ilalim ng unang tubo, ang control erythrocytes ay idinagdag sa pangalawang tubo, na naglalaman ng nais na antigen (halimbawa, Duffy-positive) at sa ikatlong tubo - isang negatibong kontrol (Duffy-negative). Magdagdag ng 2-3 patak ng karaniwang serum (sa halimbawang ito, anti-Duffy) sa lahat ng mga test tube. Ang mga test tube ay inalog upang paghaluin ang mga nilalaman at inilagay sa isang thermostat sa 37 0 C sa loob ng 45 minuto. Pagkatapos ng naturang pagpapapisa ng itlog, ang mga test tube ay tinanggal mula sa termostat, isang isotonic sodium chloride solution ay idinagdag sa itaas, ang mga nilalaman ay lubusan na halo-halong at centrifuge sa 1500-2000 thousand rpm sa loob ng 5-10 minuto. Pagkatapos ng centrifugation, maingat na sinisipsip ang supernatant at ang paghuhugas ng mga pulang selula ng dugo ay paulit-ulit ng 4 na beses. (Kapag gumagamit ng centrifuge tubes, maaari mong limitahan ang iyong sarili sa paghuhugas ng dalawang beses).

Magdagdag ng 2 patak ng isotonic sodium chloride solution sa hugasan na pulang selula ng dugo upang makakuha ng humigit-kumulang 5% na suspensyon. 1 drop ng 5% suspension ng erythrocytes mula sa bawat test tube ay inililipat sa isang puting plato, 1-2 patak ng standard serum para sa Coombs test ay idinagdag sa bawat drop ng erythrocytes at halo-halong. Ang plato ay bahagyang inalog, pagkatapos ay iwanan nang mag-isa sa loob ng 1-2 minuto at pana-panahong inalog muli, habang sabay na sinusunod ang pag-unlad ng reaksyon sa loob ng 20 minuto.
Interpretasyon ng mga resulta

Pagkakaroon ng agglutination ang mga pulang selula ng dugo (positibong resulta) ay nangangahulugan na ang dugo ay naglalaman ng ninanais na antigen (sa halimbawang ito, Duffy-positive na dugo).

Walang agglutination (negatibong resulta) ay nangangahulugan na ang nasuri sa dugo ay hindi naglalaman ng nais na antigen (Duffy negatibo).

Ang resulta ay isinasaalang-alang bilang totoo pagkatapos suriin ang mga control sample, ibig sabihin, sa halimbawa, kung ang resulta ay positibo sa Duffy-positive sample at negatibo sa Duffy-negative na sample.

5. Release form

Ang reagent ay magagamit sa likidong anyo sa mga bote ng 5 o 10 ml (1 ml ay naglalaman ng 10 dosis). Ang sodium azide ay ginagamit bilang isang pang-imbak sa isang panghuling konsentrasyon na 0.1%.

6.Imbakan

Shelf life: dalawang taon sa refrigerator sa 2-8°C. Ang isang bukas na bote ay angkop para sa paggamit kapag naka-imbak sa refrigerator, hermetically sealed, para sa buong petsa ng pag-expire.

Ang mga batayan para sa reklamo ay: kakulangan ng aktibidad, hindi tiyak, paglabag sa integridad ng bote, pagkakaroon ng mga natuklap, nag-expire na reagent. Kapag nagrereklamo, mangyaring isaad ang petsa ng pagtanggap, ang supplier (kung natanggap mo ang produkto hindi mula sa tagagawa), ang numero ng batch, at ang mga dahilan kung bakit nakitang hindi angkop ang reagent. Mangyaring maglakip ng isang protocol na may mga resulta ng pagsubok sa reagent at 2-3 hindi pa nabubuksang bote na may reagent
Ang reklamo ay dapat ipadala sa tagagawa LLC "MEDICLON": 127276

Karaniwan, walang mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo sa dugo.

Ang direktang Coombs test ay isang antiglobulin test (agglutination sa isang gel na nagbibigay-daan sa pagtuklas ng kumpletong divalent antibodies), na nakakakita ng IgG class antibodies at ang C3 component ng complement sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Karaniwan, ang mga antibodies na natukoy ng direktang pagsusuri ng Coombs ay may malawak na pagtutukoy na hindi nauugnay sa isang mahusay na itinatag na antigen. Ang isang positibong direktang pagsusuri sa Coombs ay malinaw na nagpapahiwatig na ang pasyente ay may hemolytic anemia, bagaman hindi lahat ng mga pasyente na may positibong direktang pagsusuri sa antiglobulin ay dumaranas ng sakit na ito. Sa humigit-kumulang 10% ng mga pasyente, ang mga antibodies o complement na bahagi sa lamad ng pulang selula ng dugo ay hindi matukoy ng direktang pagsusuri ng Coombs (negatibo ang pagsusuri), ngunit gayunpaman, dumaranas sila ng autoimmune hemolytic anemia. Upang linawin ang pagtitiyak ng mga antibodies sa mga ganitong kaso, ginagamit ang mga pagsusuri kasama ang kanilang elution. Ang isang direktang pagsusuri sa Coombs, positibo lamang para sa pandagdag, ay karaniwang tumutukoy sa mga malamig na antibodies ng uri ng IgM. Sa kasong ito IgM antibodies wala sa mga pulang selula ng dugo kapag basal na temperatura mga katawan. Gayunpaman, dahil sa ang katunayan na ang IgM antibodies ay aktibong nag-aayos ng complement, at nananatili ang complement sa mga pulang selula ng dugo, na may ganitong uri ng autoimmune hemolytic anemia (cold aggutinin disease), ang Coombs test ay magiging positibo lamang para sa complement.

Ang Direct Coombs test ay positibo sa autoimmune hemolytic anemia na dulot ng mainit na antibodies, autoimmune anemya ng gamot(kapag umiinom ng methyldopa, hanggang 20% ​​ng mga pasyente ay may positibong reaksyon), uri ng drug-adsorption ng hemolytic anemia, immunocomplex na uri ng hemolytic anemia (positibo lamang ang pagsusuri para sa C3), na may autoimmune hemolytic anemia na dulot ng malamig na antibodies - malamig sakit na agglutinin (positibo lamang ang pagsusuri para sa relasyong C3). Sa paroxysmal cold hemoglobinuria, negatibo ang direktang pagsusuri ng Coombs.

Indirect Coombs test - isang hindi direktang antiglobulin test (nakakakita ng mga hindi kumpletong antibodies) ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang mga hindi tipikal na antibodies sa dugo, kabilang ang mga alloantibodies sa mga dayuhang erythrocyte antigens. Nakuha nito ang pangalan nito (indirect) dahil sa ang katunayan na ito ay nangyayari sa 2 yugto. Sa una, ang serum ng dugo ng pasyente, na naglalaman ng mga hindi kumpletong antibodies, ay nakikipag-ugnayan sa idinagdag na corpuscular Ag diagnosticum nang walang nakikitang mga pagpapakita. Sa ikalawang yugto, ang idinagdag na antiglobulin serum ay nakikipag-ugnayan sa mga hindi kumpletong antibodies na na-adsorbed sa mga antigen, na may hitsura ng isang nakikitang namuo. Ang pagsasalin ng homologous (allogeneic) na mga pulang selula ng dugo o pagbubuntis ay ang pinakakaraniwang sanhi ng pagbuo ng mga anti-red blood cell antibodies na ito. Ang kumbinasyon ng isang positibong hindi direktang pagsusuri ng Coombs na may negatibong direktang pagsusuri ay hindi nagbibigay ng anumang bagay para sa diagnosis ng autoimmune hemolytic anemia. Ang isang positibong indirect Coombs test ay nagdudulot ng ilang partikular na kahirapan kapag pumipili ng dugo para sa pagsasalin at nagsasagawa ng cross-test para sa pagiging tugma sa napanatili na dugo, ngunit walang ibang diagnostic value.

Pagsubok sa Coombs– isang pagsusuri upang makita ang mga antibodies na nakakabit sa isang ibabaw o natunaw sa plasma. Ito ay ginagamit upang makita ang pagbabakuna at antibodies sa mga pulang selula ng dugo. Ang pangalawang pangalan ay antiglobulin test. Maaari itong maging direkta o hindi direkta.

Sa direktang pagsusuri ng antiglobulin nakakakita ng mga antibodies na naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Isinasagawa ito sa kaso ng hinala, iba pang mga sakit sa autoimmune, pagkatapos kumuha ng mga gamot (methyldopa, penicillin, quinine), atbp.

Ang mga pulang selula ng dugo ay na-sensitize sa vivo - ang mga antibodies ay mahigpit na nakakabit sa kanila, at ang pagdaragdag ng antiglobulin serum (anti-IgG) ay nagiging sanhi ng pagdikit ng mga sensitibong selula, na nakikita ng mata.

Hindi direktang pagsubok ng Coombs nakakakita ng mga anti-erythrocyte antibodies sa plasma ng dugo, ginagawa ito bago ang pagsasalin ng dugo at habang.

Ang mga anti-erythrocyte antibodies ay isang uri ng mga autoantibodies, i.e. antibodies laban sa iyong sariling mga tisyu. Ang autoantibody ay nangyayari sa panahon ng pathological reactivity immune system para sa ilang mga gamot, halimbawa mataas na dosis penicillin.

Ang mga pulang selula ng dugo sa kanilang ibabaw ay naglalaman ng iba't ibang mga istrukturang kemikal (glycolipids, saccharides, glycoproteins at mga protina), sa gamot na tinatawag na antigens. Ang isang tao ay nagmamana mula sa kanyang mga magulang ng isang tiyak na mapa ng mga antigen sa bawat pulang selula ng dugo.

Ang mga antigen ay pinagsama sa mga grupo at pagkatapos ay ang dugo ay nahahati sa ilang mga grupo - ayon sa AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy system. Ang pinakatanyag at makabuluhan sa gawain ng isang doktor ay ang AB0 at ang Rh factor (Rh).

Sistema ng AB0

Ang katayuan ng Rh ng isang tao ay tinutukoy ng pagkakaroon ng mga antigen na ito. Ang isang partikular na mahalagang antigen ng mga erythrocytes ay antigen D. Kung ito ay naroroon, pagkatapos ay pinag-uusapan nila Rh positibong dugo RhD, at kung wala ito doon – naku Rh negatibong Rhd.

Kung ang kaukulang antibody ay nakakabit sa mga erythrocyte antigens, ang erythrocyte ay nawasak - hemolysis.

Mga indikasyon

Ang pangunahing indikasyon para sa direktapagsubok ng antiglobulin- hinala ng hemolytic anemia. Kadalasan ito ay ginagawa para sa pangunahing autoimmune hemolytic anemia, hemolysis sa rayuma, tumor, mga nakakahawang sakit, hemolysis na dulot ng droga.

Kung lumilitaw ang anemia ilang araw o buwan pagkatapos ng pagsasalin ng dugo o may matagal na paninilaw ng balat sa isang bagong panganak, ang isang direktang pagsusuri sa Coombs ay isinasagawa din.

Hindi direktaisinasagawa ang antiglobulin test bago ang pagsasalin ng dugo at sa panahon ng pagbubuntis ng isang Rh-negative na babae.

Autoimmune hemolytic anemia

Autoimmune hemolytic anemia (pangunahing)– isang klasikong sakit na autoimmune na may hindi kilalang dahilan. Ang pakikipag-ugnayan sa loob ng immune system ay nagambala, na humahantong sa pang-unawa ng sariling mga pulang selula ng dugo bilang dayuhan. Sa mga lymph node, ang mga antibodies ng klase ng IgG (reaksyon sa t 37°C) at/o IgM (sa t 40°C) ay na-synthesize, na, kapag nakakabit sa ibabaw ng erythrocyte, ay nagpapalitaw ng isang bilang ng mga enzyme (ang complement system) at "butas" ang dingding ng erythrocyte, na humahantong sa pagkasira nito - hemolysis.

Ang mga unang sintomas ay sanhi ng parehong pagkasira ng mga pulang selula ng dugo at pagbaba ng hemoglobin. Kabilang sa mga ito:

• pagkapagod, pangkalahatang kahinaan, pagkamayamutin
• dyspnea
• pananakit ng tiyan at dibdib, pagduduwal
• madilim na kulay ng ihi
• sakit ng likod
• icteric discoloration ng balat at mauhog lamad
• pagbaba sa bilang ng mga pulang selula ng dugo at

Direktang positibong resulta Mga pagsusulit sa Coombs Kinukumpirma ng 100% ang diagnosis ng autoimmune hemolytic anemia, na nagpapatunay sa pinagmulan ng autoimmune nito. Kasabay nito, ang isang negatibong resulta ay hindi ginagawang posible na alisin ang diagnosis.

Pangalawang hemolytic anemia

Ang pangalawang autoimmune hemolytic anemia at isang positibong pagsusuri sa Coombs ay maaaring mangyari sa mga sumusunod na sakit:

• Evans syndrome
• impeksyon sa pulmonya

Ang isang positibong pagsusuri sa antiglobulin para sa mga sakit na ito ay isa sa mga sintomas, at hindi isang pamantayan para sa diagnosis.

Hemolytic disease ng bagong panganak

Dahilan hemolytic disease ng mga bagong silang - hindi pagkakatugma ng pangkat ng dugo ng ina at fetus, sa karamihan ng mga kaso ayon sa Rh system, sa mga solong kaso - ayon sa AB0 system, casuistically - ayon sa iba pang mga antigens.

Ang Rh conflict ay nabubuo kung ang fetus ng isang Rh-negative na babae ay nagmamana ng Rh-positive na dugo mula sa ama.

Ang sakit ay bubuo sa isang bagong panganak lamang kung ang ina ay nakabuo na ng mga antibodies sa kaukulang antigens, na nangyayari pagkatapos ng mga nakaraang pagbubuntis, pagpapalaglag, at hindi tugmang pagsasalin ng dugo. Karamihan karaniwang dahilan nagpapalitaw ng synthesis ng antibodies sa antigens ng erythrocyte membrane - panganganak (feto-maternal bleeding). Ang unang kapanganakan ay karaniwang nagaganap nang walang mga komplikasyon, ngunit ang mga kasunod ay puno ng hemolytic disease ng bagong panganak sa mga unang araw pagkatapos ng kapanganakan.

Mga sintomas ng hemolytic disease ng bagong panganak:

• paninilaw ng balat
• , at mga mucous membrane
• pinalaki ang atay at pali
• mga problema sa paghinga
• pamamaga ng buong katawan
• paggulo at unti-unting pagkalumbay ng central nervous system

Anemia pagkatapos ng pagsasalin ng dugo

Hindi direktang pagsubok ng Coombs na isinasagawa bago ang pagsasalin ng dugo upang masuri ang pagiging tugma, at isang direktang pagsusuri sa Coombs - pagkatapos nito kung pinaghihinalaang post-transfusion hemolysis, i.e. sa pagkakaroon ng mga sintomas tulad ng lagnat, pagtutubig (basahin sa ibaba). Ang layunin ng pagsusuri ay upang matukoy ang mga antibodies sa nasalin na mga pulang selula ng dugo na nakagapos sa mga pulang selula ng dugo ng tatanggap at ang sanhi ng post-transfusion hemolysis, pati na rin ang maagang pag-alis ng mga donor red blood cell mula sa sirkulasyon ng dugo ng ang tatanggap (ang tumanggap ng dugo).

Sintomas:

• pagtaas ng temperatura ng katawan
• pantal sa balat
• sakit ng likod
• pula
• pagduduwal
• pagkahilo

Pagde-decode

Ito ay nagkakahalaga ng pag-alala na ang mga pangunahing patakaran para sa pag-decipher ng direkta at hindi direktang mga pagsusuri sa antiglobulin ay pareho. Ang pagkakaiba lamang ay ang lokasyon ng mga antibodies - sa dugo o sa pulang selula ng dugo.

• Kung Ang direktang pagsusuri sa Coombs ay negatibo- nangangahulugan ito na ang antibody ay hindi "umupo" sa mga pulang selula ng dugo at ang sanhi ng mga sintomas ay dapat na hanapin pa at isagawa hindi direktang sample Coombs
• kung ang isang positibong resulta ng pagsusuri sa Coombs ay nakita pagkatapos ng pagsasalin ng dugo, impeksyon, o gamot - ang pagiging positibo ay tumatagal ng hanggang 3 buwan (ang habang-buhay ng mga pulang selula ng dugo ay 120 araw - 3 buwan)
• positibong resulta ng pagsusuri sa antiglobulin na may sakit na autoimmune tumatagal ng mga buwan at kahit na taon

Norm

• direktang Coombs test - negatibo
• hindi direktang pagsubok ng Coombs - negatibo

Ang isang qualitatively positive na resulta ay sinusukat sa bilang ng mga plus mula isa hanggang apat (+, ++, +++, ++++), at quantitatively sa digital form - 1:16, 1:256, atbp.

Mga disadvantages ng antiglobulin test

• hindi matukoy ang lakas ng pagbubuklod ng isang antigen sa isang antibody
• hindi kilalang bilang ng mga antibodies na nakatali
• hindi tinutukoy ang uri ng antibody
• ang isang positibong pagsusuri sa Coombs ay hindi makakatulong na matukoy ang sanhi nito
• 0,5% malusog na tao magkaroon ng positibong pagsusuri sa Coombs nang walang anumang senyales ng hemolytic anemia
• hindi angkop para sa pagsubaybay sa tagumpay ng paggamot, dahil hindi nito ipahiwatig ang aktibidad ng erythrocyte hemolysis

Karagdagang Pananaliksik

• pagsusuri ng dugo para sa
• blood smear microscopy
• — ( , ), ( , )
• — 2. 5-10-20 taon na ang nakakaraan nakatanggap ako ng pagsasalin ng dugo, nararapat bang sabihin ito sa doktor ngayon bago ang isang bagong pagsasalin ng dugo?

  Oo. Dapat talagang malaman ng iyong doktor na nakatanggap ka ng pagsasalin ng dugo, dahil nakakaapekto ito sa tamang interpretasyon ng mga resulta ng pagsusulit ngayon. Kapag tumatanggap ng dugo ng ibang tao (kahit nasubok nang maraming beses), palaging may posibilidad na ang iyong katawan ay bumuo ng mga antibodies laban sa naisalin na dugo. Ang mga antibodies na ito ang magbibigay negatibong epekto sa katayuan sa kalusugan. Para sa mga kasunod na pagsasalin ng dugo, dapat malaman ng doktor na nakatanggap ka na ng mga pagsasalin, na nangangahulugang nagkaroon ng oras para sa synthesis ng mga antibodies. Para sa mga buntis na kababaihan, ang impormasyong ito ay mas may kaugnayan.

  3. Kung may mismatch sa Rh factor sa pagitan ng ina at anak, lahat ba ng bata ay magkakasakit?

  Depende kung Rh positive o negative (RhD) ang bata. Ang mga carrier ng mga pangkat ng dugo I, II, III at IV ay maaaring Rh positibo o negatibo. Sa isang sitwasyon kung saan ang ina ay Rh-negative at ang bata ay Rh-positive, ang mga antibodies ay gagawin na sa unang pagbubuntis, ngunit pagkatapos lamang ng unang kapanganakan (o pagwawakas ng pagbubuntis) magkakaroon ng direktang kontak sa pagitan ng dugo ng ina at ang bata. Ang hemolytic effect ng antibodies ay maisasakatuparan lamang sa pangalawa at kasunod na mga kapanganakan, na hahantong sa hemolytic disease sa bagong panganak.

  Ang bawat babae na may negatibong Rh factor ay dapat na maingat na suriin sa panahon ng pagbubuntis, at pagkatapos ng panganganak pang-iwas na paggamot upang maiwasan ang paglitaw ng mga antibodies at karagdagang komplikasyon.

  4. Sa panahon ng pagbubuntis, kailangan bang malaman ang blood type ng aking asawa bago magsagawa ng Coombs test?

  Kailangan mong hindi lamang malaman, ngunit suriin din ang uri ng dugo ng biyolohikal na ama ng bata sa panahon ng pagbubuntis.

  Mga katotohanan

  • unang iminungkahi sa Cambridge noong 1945
  • threshold ng sensitivity - hindi bababa sa 300 nakapirming molekula ng antibody sa isang pulang selula ng dugo
  • ang bilang ng mga antibodies na nagpapalitaw ng hemolysis - isa-isa para sa bawat tao (mula 16-30 hanggang 300)
  • ang dynamics ng iba pang mga laboratory indicator ng hemolytic anemia (hemoglobin, bilirubin, reticulocytes) ay maaaring mag-normalize, at ang Coombs test ay mananatili sa parehong antas

  Huling binago ang pagsusulit sa Coombs: Marso 16, 2018 noong Maria Bodyan

Ang Coombs test ay isang partikular na pagsubok sa laboratoryo na nakakakita ng mga antibodies na matatagpuan sa o sa ibabaw ng isang pulang selula ng dugo. Ang pamamaraang ito ay nagbibigay-daan sa iyo upang masuri ang immune system, kabilang ang sa mga bagong silang, pati na rin makilala ang mga reaksyon ng hemolytic transfusion. Ang Coombs test ay aktibong ginagamit sa forensic na gamot at siyentipikong genetika upang matukoy ang mga erythrocyte antigens. Ang pagsunod sa lahat ng mga patakaran para sa pagsasagawa ng naturang pagsusuri ay nagbibigay-daan sa iyo upang makuha ang pinaka maaasahang resulta.

Layunin ng pagsusuri sa antiglobulin

Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay nagbibigay-daan sa iyo na makakita ng mga anti-erythrocyte antibodies na naayos sa mga pulang selula ng dugo. Ang isang positibong reaksyon sa naturang pag-aaral ay nagpapahiwatig ng pag-unlad ng isang sakit na autoimmune Dapat tandaan na ang isang negatibong resulta ay hindi ibinubukod ang pagkakaroon ng mga antibodies, dahil ang mga antibodies ay madalas na matatagpuan sa libreng anyo, iyon ay, wala silang koneksyon sa pulang dugo. mga selula. Sa ganitong mga kaso, ipinapayong magsagawa ng hindi direktang pagsusuri sa Coombs, na magpapahintulot sa pagpapasiya ng mga autonomous na sangkap sa

Paano isinasagawa ang pagsusuri?

abor venous blood ang pasyente ay isinasagawa sa umaga sa isang walang laman na tiyan, sa kabila ng katotohanan na walang makabuluhang mga kadahilanan na nakakaimpluwensya sa pangwakas na resulta ng naturang pagsubok ay natagpuan. Pinapayagan na iimbak ang kinuhang materyal sa temperatura na 2 hanggang 8 °C nang hindi hihigit sa pitong araw. Upang ang mga tagapagpahiwatig pag-aaral na ito ay tumpak hangga't maaari, ang buong dugo ay dapat maihatid sa laboratoryo sa loob ng unang dalawang oras. Sa isip, ang pagsusuri sa Coombs ay dapat magpakita ng negatibong resulta, na nagpapahiwatig ng kawalan ng mga pagbabago sa hemolytic sa katawan.

Pag-decode ng mga huling tagapagpahiwatig

Ang pagsusulit ng Coombs ay isang medyo labor-intensive na paraan ng pananaliksik na nangangailangan ng maingat at tumpak na pagpapatupad. Kapag gumagamit ng naturang pagsubok, maaaring may ilang mga paghihirap na nauugnay sa hindi tamang interpretasyon ng mga huling resulta dahil sa mahinang mga pagpapakita. mga positibong reaksyon. Dapat pansinin na ang hindi pagiging maaasahan ng pagsusuri - ibig sabihin, isang positibong pagsusuri sa Coombs - ay maaaring resulta ng hindi epektibong paghuhugas ng mga pulang selula ng dugo, pakikipag-ugnay sa mataba.
ibabaw, pati na rin ang neutralisasyon ng mga antiglobulin reagents ng mga bahagi

suwero. Ang isa pang kawalan ng pamamaraang ito ng pananaliksik ay ang kawalang-tatag ng kinuha na materyal, ang imbakan na kung saan ay may ilang mga tampok.

Ang isang maling negatibong resulta ay maaaring sanhi ng labis na pag-alog ng suspensyon ng red blood cell sa panahon ng resuspension. Ang mga maling resulta ay maaari ding dahil sa pagkakaroon ng mga contaminant ng anti-complementary antibodies, na na-adsorbed sa panahon ng incubation sa ibabaw ng nasubok na mga pulang selula ng dugo, na nagreresulta sa paglitaw ng isang positibong resulta. Kung ang mga sample ng pagsubok ay lubusan na hinugasan at ang mga kondisyon ng reaksyon ay kinokontrol, ang mga pagkukulang na ito ay madaling maalis, na magpapataas ng mga pagkakataong makuha ang pinaka-maaasahang resulta ng pagsusulit ng Coombs.